[发明专利]一种酶法制备榛子蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种酶法制备榛子蛋白的方法，包括：榛子粕粉原料的制备；榛子蛋白萃取液的制备；调节榛子蛋白萃取液pH，加入一次复合酶进行超声辅助酶解，得到一次酶解液；调节一次酶解液pH，加入二次复合酶进行超声辅助酶解，得到二次酶解液；调节二次酶解液pH进行酸沉处理，得到一次蛋白；调节一次蛋白pH，并将一次蛋白完全溶解，得到蛋白复溶液；调节蛋白复溶液的pH，并加入三次复合酶进行超声辅助酶解，得到三次酶解液；调节三次酶解液pH进行酸沉处理，得到二次蛋白；对二次蛋白进行微波灭酶处理，既得成品的榛子蛋白。该酶法制备榛子蛋白的方法，工艺安全、制备便捷，提取的榛子蛋白纯度高达85.0%以上。

主权项

1.一种酶法制备榛子蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、榛子粕粉原料的制备；步骤二、榛子蛋白萃取液的制备：将榛子粕粉原料和水混匀制得一次浆液，调节一次浆液的pH至8～8.5，并进行超声波辅助萃取，待萃取结束，离心得到上层的一次萃取清液和下层的一次沉淀；再将一次沉淀和水混匀制得二次浆液，调节二次浆液的pH至8.5～9，并进行超声波辅助萃取，待萃取结束，离心得到上层的二次萃取清液和下层的二次沉淀；并将一次萃取清液和二次萃取清液合并混匀，即得榛子蛋白萃取液；步骤三、一次酶解：调节榛子蛋白萃取液的pH至8～8.5，并加入一次复合酶进行超声辅助酶解，一次复合酶采用风味蛋白酶+木瓜蛋白酶+糖化酶，所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和糖化酶的用量为1：3～6：2～4，且一次复合酶的加入量为榛子蛋白萃取液用量的2000～3000u/g，酶解反应温度为40～45℃，酶解反应时间为80～90分钟，超声强度为1.0～1.1W/cm³，待一次酶解反应结束，得到一次酶解液；步骤四、二次酶解：调节一次酶解液的pH至8.5～9，并加入二次复合酶进行超声辅助酶解，二次复合酶采用原果胶酶+碱性果胶酶+果胶甲酯水解酶，所述原果胶酶、碱性果胶酶和果胶甲酯水解酶的用量为1：4～8：3～6，且二次复合酶的加入量为一次酶解液用量的1500～2000u/g，酶解反应温度为45～50℃，酶解反应时间为70～80分钟，超声强度为1.1～1.2W/cm³，待二次酶解反应结束，得到二次酶解液；步骤五、一次酸沉：调节二次酶解液pH至4.6～4.7进行酸沉处理，得到一次蛋白；步骤六、碱液复溶：向一次蛋白中加入氢氧化钠溶液调节pH至10～11，并在温度为40～50℃下将一次蛋白完全溶解，得到蛋白复溶液；步骤七、三次酶解：调节蛋白复溶液的pH至9～9.5，并加入三次复合酶进行超声辅助酶解，三次复合酶采用碱性纤维素酶+碱性半纤维素酶，所述碱性纤维素酶和碱性半纤维素酶的用量为1：3～6，且三次复合酶的加入量为蛋白复溶液用量的1000～1500u/g，酶解反应温度为50～55℃，酶解反应时间为60～70分钟，超声强度为1.2～1.3W/cm³，待三次酶解反应结束，得到三次酶解液；步骤八、二次酸沉：调节三次酶解液的pH至4.4～4.6进行酸沉处理，得到二次蛋白；步骤九、微波灭酶：对二次蛋白进行微波灭酶处理，得到灭酶蛋白，将灭酶蛋白水洗至呈中性，并进行冷冻干燥处理，既得成品的榛子蛋白。