[发明专利]一种乳制品中玉米赤霉醇类的可视化单分子检测方法

摘要

本发明涉及一种乳制品中玉米赤霉醇类的可视化单分子检测方法，包括：分别配制聚苯乙烯供体微球溶液和聚苯乙烯受体微球溶液；玉米赤霉醇类抗原溶液和玉米赤霉醇类抗体溶液；充分混合聚苯乙烯供体微球溶液和玉米赤霉醇类抗体溶液，得到混合溶液a；充分混合受体微球溶液和玉米赤霉醇类抗原溶液，得到混合溶液b；混合溶液a和混合溶液b分别避光反应后与乳制品悬浮液充分混合，得到混合溶液e；避光反应；聚焦超声辐射场处理后进入微流控芯片；激光照射微流控芯片，用单光子检测器记录微流控芯片小孔位置发出的光信号，得到可视化图像检测结果；本发明可实现对乳制品中单分子浓度级别的玉米赤霉醇类物质的快速检测。

主权项

一种乳制品中玉米赤霉醇类的可视化单分子检测方法，包括下列步骤：1)分别配制3‑6μg/mL质量浓度的经表面改性的聚苯乙烯供体微球溶液和经表面改性的聚苯乙烯受体微球溶液；分别配制物质的量浓度为1‑3nM的玉米赤霉醇类抗原溶液和玉米赤霉醇类抗体溶液；将待检测的乳制品制成悬浮液；2)按照1:1‑1:3的体积比取由步骤1)得到的经表面改性的聚苯乙烯供体微球溶液和玉米赤霉醇类抗体溶液并充分混合，得到混合溶液a；3)按照1:1‑1:3的体积比取由步骤1)得到的经表面改性的受体微球溶液和玉米赤霉醇类抗原溶液并充分混合，得到混合溶液b；4)将由步骤2)和步骤3)得到的混合溶液a和混合溶液b于恒温孵化器中避光反应；5)按照体积比为1:1的配比将经过步骤4)后得到的混合溶液a和混合溶液b与乳制品悬浮液充分混合，得到混合溶液c；6)将由步骤5)得到的混合溶液c于恒温孵化器中避光反应；7)选择频率不大于30kHz、功率不大于600W的聚焦超声辐射场，对经步骤6)后得到的混合溶液c和进行非接触式处理n，得到消除了非特异性结合的特异性夹心结合体溶液e；8)通过微流控系统使由步骤7)得到的溶液e进入所选用的微流控芯片，并由其中的不小于500nm的小孔捕获样品中的特异性夹心结合体；9)用波长不超过680nm的激光照射微流控芯片，用单光子检测器记录微流控芯片小孔位置发出的光信号，得到可视化图像检测结果；10)根据检测结果图像中有无发光信号判断样品中是否含有玉米赤霉醇类。