[发明专利]一种固定化酶水法提取亚麻油的工艺

摘要

本发明公开了一种固定化酶水法提取亚麻油以的新工艺，分三步：1）固定化酶的方法、2）固定化酶处理脱胶亚麻籽，3）超声提取亚麻油，该工艺具有绿色环保，本发明安全，节能，无有机试剂的污染的优势，在食品安全问题备受关注的今天具有广泛的应用前景。

主权项

一种固定化酶水法提取亚麻油的工艺，其特征是：1）.固定化酶的方法：将纤维素酶，果胶酶和半纤维素酶以1：1：1的比例混合，以0.2%的戊二酵水溶液作为交联剂，4.0%海藻酸钠水溶液作为固定剂，混合0.5ml酶溶液，0.5ml交联剂和10ml固定剂,将混合溶液置于磁力搅拌器中，120rpm/min室温搅拌30min,之后4°C条件下交联3.5h,用注射器吸取混合溶液，滴加至0.1M的氯化韩水溶液中，形成固定化酶的凝胶球; 固定化之后，分别用去离子水和0.1M PH=4.8的柠檬酸缓冲液洗去未固定化的酶和其他杂质，固定化好的酶置于0.02%的戊二醛溶液中稳定2h，进一步完成交联及巩固固定化效果，之后转移到0.1M的氯化钱溶液中贮存；2）.固定化酶处理脱胶亚麻籽：固定化酶凝胶加于250ml锥形瓶中，加入50ml去离子水中至成酶溶液(10‑200U每克亚麻籽),加入5.0g的脱胶后的亚麻籽粉末，混匀；用0.1M的柠檬酸缓冲溶液调整溶液PH=3.5‑7.5，放入控温摇床中在25‑55°C下反应3‑21h，使酶与物料充分接触以水解细胞壁和蛋白质，反应结束后，将反应溶液分装入50ml离心管中25°C，9392xg离心15min,离心后，由于离心力亚麻籽粉末沉入离心管底部，固定化酶位于亚麻籽粉末的上层，游离态的酶和蛋白质多糖等水溶性成分溶解于上清液层，分离提取液，固定化酶和亚麻籽；3）.超声提取亚麻油：将步骤2）中的亚麻籽与50ml去离子水混匀，置于250ml锥形瓶中,将锥形瓶放入超声清洗机中，在45C°、250W超声提取30min,提取液在20°C，9392xg条件下离心15min,离心之后可得到两相，固体相为亚麻籽粉末，沉入离心管底部，其上覆盖一层白色乳胶状物质，液体相中大部分亚麻油漂浮在水层表面，少部分悬浮在水相中与蛋白质形成的乳化层,用巴斯德吸管收集漂浮在水表面的亚麻油，提取过程重复2次，合并提取液，形成乳化层的亚麻油；将提取液50°C减压浓缩至10ml，加入30ml无水乙醇,遇到乙醇后，溶解在水中的蛋白质和它包裹的部分油滴会沉淀下来,抽滤之后取沉淀物，加入2ml正己烷萃取，将正己烷浓缩至干，可将油滴释放出来，其中，亚麻籽的总含油量由索氏提取方法获得，5g亚麻籽粉和50ml正己烷置于索氏提取器中，90°C下加热提取3h，提取液50°C下减蒸发除去正己烷，得到的亚麻油在氮气保护下105°C干燥1h，得到的亚麻油。