[发明专利]一种利用重组钝齿棒杆菌高效合成L‑茶氨酸的方法在审
| 申请号： | 201610454875.8 | 申请日： | 2016-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN106085938A | 公开（公告）日： | 2016-11-09 |
| 发明（设计）人： | 饶志明;杨套伟;和斐;张显;徐美娟 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P13/04;C12R1/15 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种利用重组钝齿棒杆菌高效合成L‑茶氨酸的方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明首先验证了枯草芽孢杆菌来源的GGT信号肽可以实现GGT在C.glutamicum体系中分泌表达。同时重组菌C.glutamicum SDNN403/pXMJ19‑tacM‑ggt的胞外酶活约为C.glutamicum SDNN403/pXMJ19‑ggt的2倍，这说明tacM启动子更有利于GGT酶活的合成。采用底物流加策略高产L‑茶氨酸，转化体系包含：终浓度为0.8U/mL的GGT，pH 10，37℃，从0h开始每隔两个小时补加22mmol/L的L‑谷氨酰胺，66mmol/L的乙胺。批次流加在12h时达到最大茶氨酸产量118mmol，转化率为92.8％。本文首次实现B.subtilis来源的γ‑谷氨酰转肽酶基因(ggt)在C.glutamicum SDNN403中分泌表达，通过分批流加底物获得目前报道的利用重组C.glutamicum合成L‑茶氨酸的最高产量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 重组 钝齿棒 杆菌 高效 合成 氨酸 方法 | ||
【主权项】：
一种高效分泌合成γ‑谷氨酰转肽酶的重组钝齿棒杆菌，其特征是：将SEQ ID NO:1所示ggt基因克隆至pXMJ19‑tacM载体上并转化至钝齿棒杆菌中获得。
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