[发明专利]一种以分子生物学技术分析并定量益生菌和病原菌菌体数量的方法在审

专利信息
申请号: 201610455543.1 申请日: 2016-06-21
公开(公告)号: CN107523607A 公开(公告)日: 2017-12-29
发明(设计)人: 林培茵;洪秋雅;陈威仁 申请(专利权)人: 生展生物科技股份有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 北京银龙知识产权代理有限公司11243 代理人: 许静,黄灿
地址: 中国台*** 国省代码: 台湾;71
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摘要: 一种以分子生物学技术分析并定量益生菌和病原菌菌体数量的方法,包含下列步骤步骤1取一检品溶解于无菌水中,以高速离心,将菌体离下,加入无菌水稀释,作为待测菌样品;步骤2待测菌样品以实时定量聚合酶连锁反应搭配目标菌专一性引物组;其中该目标菌专一性引物组是以目标菌的保守基因,包括16S rDNA、23S rDNA,16S‑23S rDNA的内转录区或持家基因序列片段作为扩增目标,其中该目标菌为益生菌或病原菌;以扩增片段的熔解曲线有无专一性波峰,确定该待测菌样品是否含有非目标菌种;步骤3将获得的检品Ct值带入标准品制得的标准曲线的回归方程式,可以得知待测菌样品的菌体数量。
搜索关键词: 一种 分子生物学 技术 分析 定量 益生菌 病原菌 菌体 数量 方法
【主权项】:
一种以分子生物学技术分析并定量益生菌和病原菌菌体数量的方法,该方法包含下列步骤:步骤1:取一检品溶解于无菌水中,以高速离心,将菌体离下,加入无菌水稀释,作为待测菌样品;步骤2:待测菌样品以实时定量聚合酶连锁反应搭配目标菌专一性引物组;其中该目标菌专一性引物组是以目标菌的保守基因,包含16S rDNA、23S rDNA,16S‑23S rDNA的内转录区或持家基因序列片段作为扩增目标,其中该目标菌为益生菌或病原菌;以扩增片段的熔解曲线有无专一性波峰,确定该待测菌样品是否含有非目标菌种;步骤3:将获得的检品Ct值带入标准品制得的标准曲线的回归方程式,可以得知待测菌样品的菌体数量。
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