[发明专利]一种肝癌靶向光热治疗剂及其制备方法与应用

摘要

本发明提供了一种肝癌靶向光热治疗剂及其制备方法与应用，属于生物医学工程领域。本发明的肝癌靶向光热治疗剂通过以下方法制备得到：(1)制备生物素化纳米微泡；(2)制备Cy7荧光标记的生物素化抗GPC3抗体；(3)制备生物素化还原性氧化石墨烯(RGO)；(4)通过生物素‑亲和素系统将上述三个步骤制得的产物偶联得到肝癌靶向光热治疗剂。本发明的光热治疗剂具有超声和荧光成像双重功能，通过超声靶向微泡破坏技术介导RGO靶向投递，实时监控光热治疗进程，该光热治疗剂可用于制备治疗肝癌的药物，具有优异的临床应用价值。

主权项

1.一种肝癌靶向光热治疗剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备生物素化纳米微泡；(2)制备Cy7荧光标记的生物素化抗GPC3抗体；所述的Cy7荧光标记的生物素化抗GPC3抗体是通过以下方法制备得到的：①取生物素化抗GPC3抗体；②配置交联反应液：精确称取NaHCO3粉末0.378g、Na2CO3粉末0.053g、NaCl粉末0.368g于50ml容量瓶中，加无菌双蒸水定容至50ml；③Cy7粉末溶于DMSO中，浓度1mg/ml，全程避光操作；④将抗体以2mg/ml的浓度溶于交联反应液中，按抗体与Cy7质量比为1mg比150μg的比例反应，将Cy7荧光染料缓慢加入抗体交联反应液中，轻轻摇晃混匀，避光4℃反应8小时；⑤滴加5mol/L的NH4Cl溶液25uL终止反应，避光4℃继续反应8小时；⑥所得交联反应液通过葡聚糖凝胶G10层析柱避光分离纯化，使用冷冻干燥机将滤液避光冻干，所得冻干粉即所制备的Cy7荧光标记生物素化抗GPC3抗体；(3)制备生物素化还原性氧化石墨烯；所述的生物素化还原性氧化石墨烯通过以下方法制备得到，将生物素化聚乙二醇与2mg/mL还原性氧化石墨烯溶液按照质量比1:10比例混合后超声处理80‑100min，然后离心去除不稳定的RGO，取上清液，用滤膜过滤去除多余的生物素化聚乙二醇，得到具有生物相容性的生物素化还原性氧化石墨烯RGO‑PEG‑Biotin；(4)通过生物素‑亲和素系统将上述三个步骤制得的产物偶联得到肝癌靶向光热治疗剂。