[发明专利]一种构建大肠杆菌高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法在审
| 申请号： | 201610465781.0 | 申请日： | 2016-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN107541482A | 公开（公告）日： | 2018-01-05 |
| 发明（设计）人： | 吴志猛;赵鑫锐;洪皓飞;邓涛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/52;C12N15/57;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种构建大肠杆菌高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法，属于基因工程领域。本发明成功实现了SortaseA在大肠杆菌中的高效分泌表达，解决了目前已有报道中该酶无法分泌表达且胞内表达水平较低的问题。在摇瓶水平，所得SortaseA产量可达90.2mg/L，胞外酶活水平可达34.2U/mL；为后续SortaseA的工业化生产奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 大肠杆菌 高效 分泌 表达 肽酶 sortasea 方法 | ||
【主权项】：
一种高效分泌表达SortaseA的重组大肠杆菌，其特征在于，以pET22a为表达载体，并利用载体上自带的PelB信号肽构建携带编码Sortase A的基因的重组表达载体，将重组表达载体与分子伴侣pG‑Tf2质粒共同转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。
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