[发明专利]一种用于制备ε‑聚赖氨酸的微生物球的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于制备ε‑聚赖氨酸的微生物球的制备方法，属于ε‑聚赖氨酸制备技术领域。本发明利用蚕茧为原料进行处理，将自制培养基作为填充物，对处理蚕茧壳进行填充，制得微生物球基体，浸泡于由无菌水淋洗培养菌种的培养基表面得到的淋洗液中，之后再移入海藻酸钠浸泡，进行包裹，再使用竹膜进行表面包裹，从而得到ε‑聚赖氨酸的微生物球的制备方法。实例证明，本发明操作简单，反应条件温和，仪器取材容易，显著提高了ε‑聚赖氨酸的发酵产量和生产强度，最终使得制得的ε‑聚赖氨酸收率和纯度均达到了90％以上，可用于工业化生产。

主权项

一种用于制备ε‑聚赖氨酸的微生物球的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）使用水将蚕茧壳表面洗净，再按固液比1:3，将其与质量分数为1.2％碳酸氢钠溶液放入低压锅中，设定压力为70～80kPa，温度为95～100℃，蒸煮50～70min后自然冷却至室温，过滤收集蚕茧壳浸泡于质量分数为15％的氨水溶液中，再置于15～20℃下静置2～4h；（2）上述静置后过滤，将过滤后的蚕茧壳与蒸馏水按固体比1:3混合均匀，并置于超声振荡器中，在23～26KHz下振荡50～60min，过滤并将滤渣放入风干机中风干，得处理蚕茧壳；（3）按重量份数计，取60～70份蛋白胨、40～50份酵母浸膏、20～25份玉米胚芽粕、1～3份制霉素、0.3～0.6份磷酸二氢钾、0.4～0.5份磷酸氢二钾、0.6～0.8份水杨酸及6～8份琼脂搅拌均匀，并杀菌消毒，得培养基，将所得的培养基填充至上述处理蚕茧壳中，得微生物球基体，备用；（4）按接种量10～15％，将乳酸链球菌接种至上述培养基，并将培养基移至恒温摇床中，设定温度为28～32℃，使用紫外线进行照射，培养10～15h，再将培养基移至微波反应器中，室温下培养4～6h，随后取出，使用无菌水淋洗培养基表面至其表面无菌丝，收集淋洗液；（5）将步骤（3）备用的微生物球基体浸泡于上述淋洗液，蚕茧壳开口朝上，使淋洗液淹没微生物球基体，静置4～6h，将微生物球基体取出浸泡于质量分数为1.2％的海藻酸钠溶液中，静置3～5min，将微生物球基体取出室温下风干，使用竹膜将其表面包裹，即可得用于制备ε‑聚赖氨酸的微生物球。