[发明专利]一种海带降压肽的制备方法

摘要

本发明公开了一种海带降压肽的制备方法，属于降压肽制备技术领域。本发明取海带洗涤粉碎后，经超声波和CO₂超临界萃取得含海带蛋白质的溶液备用，再取蛋白胨等制得培养基，接种芽孢杆菌培养得芽孢杆菌菌种，与牛肉膏等混合发酵，离心后得蛋白酶液，与备用含海带蛋白质溶液混合反应，过滤得滤液，加入活性炭等混合，过滤再经浓缩干燥制得海带降压肽。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，产物易分离，无微生物侵染变质现象发生，可控性强；所得降压肽产率和活性高，纯度高达99.2%以上。

主权项

一种海带降压肽的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取30～50g海带，用去离子水洗涤3～5次，并用粉碎机粉碎，将海带粉末加入烧杯中，向烧杯中加入300～400mL去离子水，并置于3000～3200W超声波萃取机中，超声提取30～40min，过滤，得到滤液；（2）将上述滤液置于CO₂超临界萃取仪中，再加入200～300mL去离子水，控制萃取压力为30～35MPa，萃取温度为40～50℃，CO₂流量为30～40kg/h，萃取30～40min，得含海带蛋白质的溶液，备用；（3）依次称取10～15g蛋白胨、10～15g牛肉膏、5～7g氯化钠加入培养皿中，再加入800～1000mL去离子水，搅拌5～10min，制成培养基，接种3～5株芽孢杆菌到培养基上，再将培养基置于摇床中，在40～42℃下，振荡培养72～74h，将培养液放入7000～8000r/min离心机中离心分离30～40min，弃去上清液，得芽孢杆菌菌种；（4）向发酵罐中依次加入3～5g牛肉膏、5～7g氯化钠、5～7g蛋白胨、600～800mL去离子水，搅拌10～20min，再加入10～20%上述所得芽孢杆菌菌种，搅拌均匀后，在45～55℃下，发酵24～26h，待发酵结束，将发酵液在7000～8000r/min下离心20～30min，弃去下层杂质，得蛋白酶液；（5）将上述蛋白酶液加入烧瓶中，将烧瓶置于水浴锅中，控制温度为45～55℃，再向烧瓶中加入步骤（2）备用的含海带蛋白质溶液，搅拌反应2～3h，随后将温度升至90～100℃，搅拌20～30min，过滤得滤液，向滤液中依次加入2～4g活性炭、3～5g磁性水凝胶，搅拌10～20min，过滤得海带降压肽溶液，将其减压蒸馏至原体积1/4，并置于‑20～‑10℃真空冷冻干燥器中，冷冻干燥10～12h，碾磨得粉末，即海带降压肽。