[发明专利]一种快速检测硝基还原酶的双光子荧光探针

摘要

本发明公开了一种可以检测硝基还原酶的双光子荧光探针，所述荧光探针命名为3‑硝基‑7‑二乙胺基香豆素，本发明公开的双光子荧光探针对细胞中的硝基还原酶有响应，并且随着细胞内硝基还原酶浓度的增加，荧光强度相应增强，本发明提供的探针可以通过荧光成像对肿瘤内乏氧区域的硝基还原酶进行检测。

主权项

1.下述化合物在作为检测硝基还原酶的双光子荧光探针方面的应用，其特征在于，所述化合物的化学结构式为：；命名为：3‑硝基‑7‑二乙胺基香豆素；探针的细胞成像测试：将密度为3 × 105 个/mL的HeLa细胞接种到灭菌的铺有盖玻片的35 mm培养皿中，在CO2培养箱中分成两组培养，待细胞贴壁后，一组在常氧条件中培养；一组在乏氧条件中培养，均培养12 h；向两组培养皿中加入3‑硝基‑7‑二乙胺基香豆素，使其终浓度均为5 μM；继续分别在两种条件下培养0.5 h，然后将细胞培养液吸走，用PBS缓冲液冲洗细胞3次，将两组细胞在单光子条件下分别拍摄荧光图像或将将两组细胞在双光子条件下分别拍摄荧光图像；所述的盖玻片为22 mm × 22 mm；所述的CO2培养箱为温度为37 ℃，5 % CO2；所述的常氧条件温度为37 ℃，5 % CO2；所述的乏氧条件为温度为37 ℃，5 % CO2，1 % O2。