[发明专利]一种双水相萃取-超声波联合分离提纯藻蓝蛋白的方法在审
| 申请号： | 201610473238.5 | 申请日： | 2016-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN106008705A | 公开（公告）日： | 2016-10-12 |
| 发明（设计）人： | 陈慧怡 | 申请（专利权）人： | 瑞安市智造科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/795 | 分类号： | C07K14/795;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 谈杰 |
| 地址： | 325200 浙江省温州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种双水相萃取‑超声波联合分离提纯藻蓝蛋白的方法，具体操作步骤为：将螺旋藻采用反复冻融的方法破壁后收集上层清液得到藻蓝蛋白粗提液，再采用葡聚糖‑无机盐双水相萃取，并置于超声波中超声15‑30分钟，再静置10‑15分钟，取上相在截留相对分子质量为5000的透析膜中透析12‑20小时后，再经冷冻干燥得藻蓝蛋白粉末。本发明双水相萃取和超声波联合的方法对藻蓝蛋白进行提纯，具有选择性高，体系分相速度快的优点，且操作简便，设备常规，适合工业化生产。本发明所述方法制得藻蓝蛋白粉末中藻蓝蛋白纯度高达(A620/A280)3.78，总收率高达90.6％。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 双水相 萃取 超声波 联合 分离 提纯 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种双水相萃取‑超声波联合分离提纯藻蓝蛋白的方法，其特征在于，所述分离提纯藻蓝蛋白的方法包括如下步骤：(1)粗提液制备：将螺旋藻粉加入水中浸泡6～8小时后，于‑20℃下冷冻2～5小时后，再于25℃融化，如此反复冻融3～4次破壁，再将所得溶液离心处理后，收集上清液即为含藻蓝蛋白的粗提液；(2)双水相萃取：向步骤(1)所得含藻蓝蛋白的粗提液中加入葡聚糖和无机盐，震荡混合后，置于超声波中超声15‑30分钟，再静置10‑15分钟，收集上相；(3)成品制备：将步骤(2)所得上相在截留相对分子质量为5000的透析膜中透析12‑20小时后得藻蓝蛋白水溶液，再于‑15～‑10℃冷冻干燥12‑20小时得藻蓝蛋白粉末。
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