[发明专利]一种右旋糖酐的制备方法

摘要

本发明公开了一种右旋糖酐的制备方法，属于右旋糖酐制备技术领域。本发明将培养得到的肠膜状明串珠菌菌体和产黄青霉菌菌体与海藻酸钠混合，滴入氯化钙中造粒，之后过滤，干燥，得固定化颗粒，置于装有甘蔗溶液的发酵罐中，发酵后提升温度搅拌灭活，从而得到右旋糖酐的制备方法。实例证明，本发明方法独特新颖，发酵过程简单易行，无需后续加工，且在制备的过程中无任何大量氯化物，简化工艺的同时保证了右旋糖酐的质量和品质，使得最终制得的右旋糖酐重均分子量为5000～7000D，分子量分布小于2.0，完全符药用标准。

主权项

一种右旋糖酐的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）向500mL培养皿中依次加入10～20g蔗糖、0.2～0.4g蛋白胨、0.2～0.4g磷酸氢二钠、0.03～0.05g磷酸二氢钾、0.5～0.7g酵母浸膏、200～300mL去离子水，混合制成1号培养基，培养肠膜状明串珠菌；（2）称取0.1～0.3g肠膜状明串珠菌接种到上述1号培养基中，在20～25℃下，用摇床振荡培养96～120h后，将培养液在5000～7000r/min下离心30～40min，弃去上清液，得到肠膜状明串珠菌菌体，备用；（3）称取20～30g去皮土豆，切成块后放入烧杯中，向烧杯中加入400～500mL去离子水，加热至沸腾，保温20～30min，再过滤，得滤液，向滤液中依次加入2～3g蔗糖、3～5g琼脂，混合制成2号培养基，培养产黄青霉菌；（4）称取0.1～0.3g产黄青霉菌接种到上述2号培养基中，在25～30℃下，用摇床振荡96～120h后，将培养液在6000～8000r/min下离心40～50min，弃去上清液，得到产黄青霉菌菌体；（5）向烧杯中加入50～60mL质量浓度为6～8%海藻酸钠溶液，再称取5～7g上述产黄青霉菌菌体和5～7g上述步骤（2）中备用的肠膜状明串珠菌菌体依次加入到海藻酸钠溶液中，搅拌20～30min，得到混合液，用5mL一次性注射器将混合液滴入盛有300～400mL0.05mol/L氯化钙溶液中造粒，在25～27℃下静置固定化24h，过滤，将滤渣用去离子水洗涤3～5次，在45～55℃烘箱中干燥5～6h，得到固定化颗粒；（6）将上述固定化颗粒加入到盛有200～300mL质量浓度为12～14%蔗糖溶液的发酵罐中，在30～50℃下，发酵24～26h，待发酵结束，将温度升至70～100℃，持续搅拌直至肠膜状明串珠菌、产黄青霉菌以及产生的内切右旋糖酐酶灭活，过滤，将滤液进行减压蒸馏，从而得到一种右旋糖酐。