[发明专利]早期鉴定‘Hort 16A’猕猴桃开放性授粉后代性别的方法

摘要

早期鉴定‘Hort 16A’猕猴桃开放性授粉后代性别的方法，属于鉴定植物性别的方法。本发明通过SNP标记的筛查，确定能稳定扩增且扩增产物在雌雄株之间存在差异的引物2‑1；用该引物在已知性别‘Hort 16A’猕猴桃自由授粉后代中进行PCR扩增，比对雌雄株之间的序列，确定能够鉴定性别的SNP标记；以雄性6号样本（X6）为对照，59bp处表现为t纯合的为雌性个体，表现为t/c杂合的为雄性个体；71bp处表现为g纯合的为雌性个体，表现为g/a杂合的为雄性个体。本发明简单、高效、快速，为‘Hort 16A’猕猴桃的生产实践提供了极大的便利。

主权项

1.早期鉴定‘Hort 16A’猕猴桃开放性授粉后代性别的方法，包括以下步骤：(1)取‘Hort 16A’猕猴桃开放性授粉后代植株，利用Ezup柱式法提取植物基因组DNA作为样本；(2)SNP标记的筛选，包括：针对性别相关基因片段，建立PCR反应体系，配置25μL PCR反应体系，其反应体系以下表的引物序列作为PCR扩增SNP差异的上下游引物，扩增样本，筛选雌雄株之间的SNP差异；表1 SNP标记的引物序列(3)将步骤(2)扩增的核苷酸序列作为雌雄株之间的SNP标记的对照序列，比对雌雄株之间的SNP位点，筛选区分‘Hort 16A’猕猴桃开放授粉后代性别的SNP标记位点。