[发明专利]肿柄菊叶片上表皮离析制片的方法

摘要

肿柄菊叶片上表皮离析制片的方法，包括如下步骤：先用过氧化氢和冰乙酸的混合液离析液浸泡肿柄菊叶片，将处理过的肿柄菊叶片置于载玻片上撕下下表皮放入染色液中，再先后滴30％过氧化氢和30％冰乙酸的混合液与有效氯含量≥5.5％的安替福民原液于带有叶肉的上表皮上，处理1～2min。用镊子将叶肉除去，制片，在光学电镜下观察。本发明采用过氧化氢—冰醋酸混合液离析液处理和次氯酸钠处理结合，解决了肿柄菊叶片上表皮制作玻片难的问题。

主权项

1.肿柄菊叶片上表皮离析制片的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、将新鲜的肿柄菊叶片切成1～0.5cm×1～0.5cm，用FAA固定液固定，将固定24小时以上的叶片取出，置于装有30%过氧化氢和30%冰乙酸的混合离析液的指形瓶中，在80℃烘箱中烘烤7～24小时；（2）、将离析后的肿柄菊叶片置于装有蒸馏水的培养皿中，用镊子和解剖针将肿柄菊叶片下表皮撕下，（3）、在蒸馏水中，将除去下表皮的肿柄菊叶片置于干净的载玻片上，使带有叶肉面贴近载玻片；（4）、向载玻片上的肿柄菊叶片先滴加30%过氧化氢和30%冰乙酸的混合液0.5～2ml，再滴加有效氯含量≥5.5%的安替福民原液0.5～2ml处理1～2 min；（5）、将处理之后的载玻片全部浸泡在蒸馏水中，浸泡过程需要摇动蒸馏水1～2 min，再倒掉蒸馏水，重复操作2～3次；（6）、将清洗干净的叶片置于干净的载玻片上，使叶肉面贴近载玻片，表皮面朝上；（7）、向载玻片上的叶片滴上100%酒精1ml，再滴上固绿染色液0.5～2ml，染色1～2 min，再倾斜载玻片，然后缓慢滴加70%酒精，以清洗多余的固绿染色液；（8）、向已经染好固绿的叶片上滴加0.5～2ml番红染色液，染色8～10分钟，倾斜载玻片，缓慢滴加蒸馏水，将番红染色液清洗干净；（9）、向叶片中滴加50%甘油1ml，用盖玻片封片，在光学显微镜下观察叶片上表皮结构。