[发明专利]一种酶菌协同制备菜籽肽的方法

摘要

本发明涉及一种酶菌协同制备菜籽肽的方法，属才菜籽肽制备技术领域。本发明首先对脱脂菜籽粕进行高温加热，除去抗营养因子硫代葡萄糖苷，得到脱脂菜籽粕混合液，再将其与利用混合菌种培养发酵得到混合酶液、明胶等物质混合过滤，得到菜籽粕提取液，最后将其与磁性水凝胶等物质混合，利用CO₂超临界进行萃取，即可得到菜籽肽。本发明制备的菜籽肽含盐量低，且不会因为大量色素的存在，而影响产品色泽；且菜籽肽蛋白酶的活性得以提高，提高了20～25％，水解能力达到12％以上。

主权项

一种酶菌协同制备菜籽肽的方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取200～300g脱脂菜籽粕加入到烧杯中，向烧杯中加入700～800mL去离子水，加热至沸腾，保温1～2h后停止加热，使其自然冷却至室温，得到预处理后的脱脂菜籽粕混合液，备用；（2）依次称取10～15g蛋白胨、5～10g牛肉膏、10～15g氯化钠、10～20g葡萄糖、3～5g硫酸镁、3～5g硫酸铁、3～5g磷酸氢二钾加入到培养皿中，再加入1000～1200mL去离子水，搅拌10～20min，制成培养基；（3）依次将2～4株芽孢杆菌、2～4株黑曲霉菌、2～4株杂色云芝菌接种到培养基中，在30～35℃下，用摇床振荡培养72～96h后，将培养液在6000～8000r/min下离心20～30min，弃去上清液，得到混合菌种，备用；（4）向发酵罐中加入依次加入400～500mL质量浓度为12～14%葡萄糖溶液、5～10g马铃薯、5～10g酵母膏、5～10g玉米粉、2～4g氯化铵、2～4g硫酸铵、2～4g磷酸氢二钠，搅拌制成发酵液；（5）向上述发酵液中加入发酵液质量10～20%步骤（3）备用的混合菌种，搅拌均匀后，在45～55℃下，发酵24～26h，待发酵结束，将发酵产物在6000～8000r/min下离心30～40min，弃去下层杂质，得到混合酶液；（6）将上述混合酶液加入到烧瓶中，将烧瓶置于水浴锅中，控制温度在40～50℃，再依次加入2～3g纤维素酶、2～3g果胶酶、1～3g半纤维素酶、3～4g明胶，搅拌5～10min后，加入上述步骤（1）备用的预处理后的脱脂菜籽粕混合液，搅拌反应3～4h，待反应结束，将温度升至90～100℃，搅拌20～30min，过滤，得到滤液，即为菜籽粕提取液；（7）向菜籽粕提取液中依次加入2～4g活性炭、3～5g磁性水凝胶，搅拌10～20min，过滤，得到滤液，再加入外加磁场，从滤液中将磁性水凝胶回收，得到菜籽肽混合液，将菜籽肽混合液加入到CO₂超临界萃取仪中，控制萃取压力为25～35MPa，萃取温度为40～50℃，CO₂的流量为25～35kg/h，萃取20～30min，得到菜籽肽溶液，将菜籽肽溶液进行减压蒸馏至膏状，再置于‑20～‑10℃真空冷冻干燥器内，干燥5～6h，得到固体粉末，即菜籽肽。