[发明专利]一种骨炭益生菌制剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种骨炭益生菌制剂的制备方法，属于生物制剂制备技术领域。本发明首先将牛骨高温炭化后，与氯化锌溶液搅拌混合，过滤，将滤饼活化，碾磨过筛，得活化骨炭粉末，接着将利用嗜酸乳杆菌等菌种制备的菌种悬浊液混合，分散处理，振荡干燥，得载菌骨炭，最后将聚乙烯吡咯烷酮喷洒至载菌固炭上，进行冷冻干燥，即可制备骨炭益生菌制剂。本发明制备的骨炭益生菌制剂活菌浓度高，活菌数达到6×109cfu/g以上，添加到饲料中可起到提高饲料利用效率的作用。

主权项

一种骨炭益生菌制剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）收集牛骨洗净并晾干，用粉碎机粉碎并过筛，制备得45～60目牛骨粉末，收集牛骨粉末并置于马弗炉中，对其通氮气排除空气后，按5℃/min缓慢升温至850～900℃炭化处理10～15min，待炭化完成后，静置冷却至室温，制备得炭化骨粉；（2）按质量比1:5，将上述制备的炭化骨粉与质量浓度40%氯化锌溶液搅拌混合，随后过滤并收集滤饼，将滤饼置于高温热解炉中，在100～120℃下活化处理10～15min，随后静置冷却至室温，碾磨并过筛，制备得100～120目活化骨炭粉末，备用；（3）将嗜酸乳杆菌、口乳杆菌分别按接种量10%，接种至MRS培养基上，随后将培养基置于37℃、120～150r/min下培养20～24h，随后过滤并收集滤液，在2000～3000r/min下离心分离10～15min，收集下层菌种，按质量比1:70，将下层菌种分散至质量浓度0.9%生理盐水中，制备得菌种悬浊液；（4）按质量比1:10，将步骤（2）制备的活化骨炭粉末与上述制备的菌种悬浊液搅拌混合，在200～300W下超声分散处理10～15min，随后将其置于无菌不锈钢平板模具中，在30～35℃下，按200～220r/min振荡干燥至恒重，制备得载菌骨炭；（5）按质量比1:5，将聚乙烯吡咯烷酮均匀喷洒至上述制备的载菌骨炭上，在‑85～‑80℃下预冻1～2h，待预冻完成后，再在‑55～‑50℃、1.2～1.7MPa下干燥20～24h，即可制备得一种骨炭益生菌制剂。