[发明专利]一种AD293球形细胞团的培养方法在审
| 申请号： | 201610486301.9 | 申请日： | 2016-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN105936889A | 公开（公告）日： | 2016-09-14 |
| 发明（设计）人： | 孙贝贝;陈瑞爱;徐家华;王新秋;谢小雨 | 申请（专利权）人： | 肇庆大华农生物药品有限公司;广东温氏大华农生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 赵赛;马簪 |
| 地址： | 526238 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种AD293球形细胞团的培养方法，包括以下步骤：1)配置悬浮培养基：培养基中包括以下组成成分：无血清培养基、胎牛血清、血清替代物、非必需氨基酸溶液、表皮细胞生长因子、转化生长因子、甲基纤维素；将物质混合溶解均匀，得到悬浮培养基；2)准备AD293细胞：使用10％胎牛血清的DMEM培养基在细胞瓶中复苏AD293细胞，进行传代；3)培养细胞：在摇瓶中加入经步骤2)处理的AD293细胞和步骤1)得到的悬浮培养基；然后置于摇床，温度为37℃的条件下培养48～72h，获得AD293球形细胞团；通过该培养方法形成的AD293球形细胞团，其细胞密度比球形微载体悬浮培养的细胞密度高10倍以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ad293 球形 细胞 培养 方法 | ||
【主权项】：
一种AD293球形细胞团的培养方法，其特征在于包括以下步骤：1)配置悬浮培养基：培养基中包括以下组成成分：体积比85～95％Gibco无血清培养基、体积比2～5％Gibco胎牛血清、体积比2～10％Gibco血清替代物、体积比0.5～2％Gibco非必需氨基酸溶液、质量体积比1～10ng/mL表皮细胞生长因子、质量体积比1～10ng/mL转化生长因子、质量体积比0.5～5mg/mL甲基纤维素；将上述物质混合溶解均匀，得到悬浮培养基；2)准备AD293细胞：使用含体积比为10％胎牛血清的DMEM培养基在细胞瓶中复苏AD293细胞，按照体积比1：3的比例进行传代，然后培养AD293细胞直到细胞量为107～6×108个；3)培养细胞：在摇瓶中加入经步骤2)处理的AD293细胞和步骤1)得到的悬浮培养基；然后置于摇床，放入二氧化碳培养箱中，温度为37℃的条件下培养48～72h，获得AD293球形细胞团。
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