[发明专利]一类汞离子荧光探针及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一类汞离子荧光探针及其制备方法和用，属于环境分析、生物分析检测的荧光探针技术领域。本发明的技术方案要点为：一类汞离子荧光探针，是罗丹明B的底环修饰衍生物，结构式为，其中取代基F位于苯环上的邻位、间位或对位。本发明还公开了该荧光探针的制备方法及其在检测水环境体系、药物或生物细胞体系中汞离子含量中的应用。本发明合成步骤简单，反应时间短，易于提纯且收率较高，该化合物是汞离子的荧光增强型探针，对汞离子具有高度专一性，可在生理环境条件下工作，具有应用于生物荧光成像的前景。

主权项

1.罗丹明B的底环修饰衍生物作为汞离子荧光探针在选择性检测水环境体系中汞离子含量中的应用或罗丹明B的底环修饰衍生物在制备选择性检测药物中汞离子含量的汞离子荧光探针中的应用，其特征在于：所述罗丹明B的底环修饰衍生物的结构式为其中取代基F位于苯环上的邻位时荧光探针化合物标记为RFS，取代基F位于苯环上的间位时荧光探针化合物标记为RFSM，取代基F位于苯环上的对位时荧光探针化合物标记为RFSP；其具体检测过程为：（1）将汞离子荧光探针溶于二甲基亚砜溶液中，配成摩尔浓度为0.1 mmol/L的汞离子荧光探针标准溶液，用N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-2-乙烷磺酸的缓冲溶液配制不同浓度的汞离子储备液，取30 μL汞离子荧光探针标准溶液分别与3 mL不同浓度的汞离子储备液混合，室温下静置10 min，分别测混合液在波长589 nm处的荧光发射强度，以汞离子的浓度为横坐标，以荧光强度为纵坐标绘制标准曲线，或再拟合得到标准直线方程；（2）将摩尔浓度为0.1 mmol/L的汞离子荧光探针的二甲基亚砜溶液30 μL加入到3 mL待测样品溶液中，室温下静置10 min，测定被检测溶液在波长589 nm处的荧光发射强度，再与标准曲线对比或代入标准直线方程计算，得到待测样品溶液中汞离子的浓度，荧光探针化合物RFS、RFSM及RFSP对应的检测限依次为0.6x10-7 mol/L、2.7x10-7 mol/L和1.2x10-7mol/L；所述汞离子荧光探针的具体合成过程为：步骤（1），在反应容器中将罗丹明B溶于乙醇中，再加入水合肼水溶液，其中水合肼水溶液的质量浓度为80%，水合肼与罗丹明B的摩尔比为20:3，于85℃的油浴中回流反应，TLC监控原料反应完全后加入蒸馏水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取反应体系，收集有机相后减压蒸馏得到罗丹明B酰肼化合物；步骤（2），在反应容器中加入氟基取代苯异硫氰酸酯类化合物和步骤（1）得到的罗丹明B酰肼化合物，其中氟基取代苯异硫氰酸酯类化合物与罗丹明B酰肼化合物的摩尔比为1.5:1，再加入异丙醇，于85℃的油浴中搅拌回流反应，TLC监控原料反应完全后降至室温，减压蒸馏除去溶剂并加入中性氧化铝对其干法拌样，使用中性氧化铝作为固定相进行柱层析分离纯化得到氟基取代荧光探针。