[发明专利]一种雪莲离体培育方法

摘要

本发明公开一种雪莲离体培育方法，采用雪莲的花托外植体诱导培养，先用蓝光照射再用荧光照射，二者的结合大大缩短了愈伤组织的愈伤分化时间，提高了愈伤组织的形成数量与效率。本发明经离体培养得到的雪莲幼苗，缩短培育周期，保持雪莲基因的典型性，具有在雪莲人工栽培领域的应用前景。

主权项

一种雪莲离体培育方法，其特征在于：具体步骤如下：(1)花托外植体预处理：选取雪莲的花蕾，在4℃环境中冷藏3～5天后，将花蕾取出自然恢复至室温，剥去苞片和小花，用纯净水冲洗，先在0.05％的升汞水溶液中消毒5～8min，再用70％的酒精消毒20～40s，之后用无菌水冲洗3次，即得到雪莲花托外植体；以上涉及的百分比均为体积百分比；(2)外植体接种及诱导培养：将雪莲花托外植体移入到灭菌后的第一培养基中，将温度设定为23±1℃，以蓝光灯为光源，光照强度控制为400～800Lx，光周期控制为光14h/暗10h，每十天更换一次培养基，直到诱导出愈伤组织；(3)转移诱导培养：将步骤(2)得到的愈伤组织转移到第二培养基，温度为27±1℃，以荧光灯为光源，光照强度控制为1800～2500Lx，光周期控制为光14h/暗10h，愈伤组织诱导出嫩芽后，将嫩芽从雪莲花托外植体上完整地切下，转移到第三培养基内继续以相同的条件培养至形成雪莲幼苗；(4)幼苗的驯化与炼苗：将雪莲幼苗移栽到炼苗基质中，并逐步转移到外部环境中，在幼苗适应外部环境正常生长后，再移栽至普通土壤中正常培养。