[发明专利]一种Cas9核酸内切酶分泌型表达载体及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201610494618.7 | 申请日： | 2016-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN105907777A | 公开（公告）日： | 2016-08-31 |
| 发明（设计）人： | 张继泉;宋凤阁;桂天书;相建海 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66;C12N9/16 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 李颖;周秀梅 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及基因重组技术领域，具体为一种Cas9核酸内切酶分泌型表达载体的构建及其应用。根据Cas9核酸内切酶基因序列和分泌表达载体pCT7‑CHISP6H的序列信息，通过In‑fusion的方法构建重组表达质粒pCT7‑CHISP6H‑Cas9。将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行重组表达，获得分泌表达的Cas9核酸内切酶。亲和层析纯化得到了具有生物活性的重组蛋白，该重组蛋白可以在gRNA的指导下，体外切割靶标质粒。具有生物活性的Cas9核酸内切酶重组蛋白的成功制备，对开展基于重组Cas9核酸内切酶的基因组编辑具有重要的理论意义和实践意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 cas9 核酸 内切酶 分泌 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种Cas9核酸内切酶分泌型表达载体，其特征在于：分泌型表达载体为含有Cas9核酸内切酶基因和分泌表达载体序列。
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