[发明专利]河蚌三倍体纯系高效育成方法

摘要

本发明公开了一种河蚌三倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：他莫昔芬喂养料的配备、对母蚌进行投喂他莫昔芬喂养料、热休克处理、雌激素抑制剂溶液配制、雌激素抑制剂溶液泡浴、获得河蚌的雄性四倍体纯系、采用回交的方式，获得三倍体。通过此方法，可获得100%的河蚌三倍体纯系，提高了三倍体的育成率与出苗率，减少了育种与选种的麻烦，更主要是对自然水产品种种质和生态环境无污染。

主权项

河蚌三倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬喂养料的配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入到河蚌人工饲养饲料中，制成喂养料，其中他莫昔芬含量为10～20g/500g喂养料，待用；（2）投喂：在母蚌产卵前5～10天，按常规饲料投喂方法对母蚌进行投喂他莫昔芬喂养料，每天两次，早上8：00每100g母蚌投喂5～10g，下午6：00每100g母蚌投喂8～10g；至其卵发育成熟，然后，取公蚌在吊养在一起，使其自然产卵受精，得受精“怀卵”母蚌；（3）热休克处理：观察“怀卵”母蚌受精卵的发育情况，在受精卵第一次卵裂前2～3min，把上述“怀卵”母蚌放入溶氧达5～8mg/l、温度为39～42℃恒温水中，热休克3～5min，待用；（4）雌激素抑制剂溶液配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为120～240mg/l，睾酮的浓度为10～50mg/l；（5）取步骤（3）处理后的“怀卵”母蚌，放入用步骤（4）所制备的雌激素抑制剂溶液中，常温泡浴90～150S，“怀卵”母蚌与溶液重量比为1：2，通过充氧，使溶液中的氧气含量达5～10mg/l；（6）取步骤（5）处理后的“怀卵”母蚌，放入育苗池中进行常规培育；直至产出钩介幼虫，寄生到鱼体，再脱落，形成仔蚌，从而获得河蚌的雄性四倍体纯系；（7）三倍体河蚌的获得：取步骤（6）的雄性四倍体作为父本，取普通二倍体作为母本，采用回交的方式，获得100%三倍体。