[发明专利]河蚬雄性四倍体纯系高效育成方法

摘要

本发明公开了一种河蚬雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：他莫昔芬喂养料的配备、对母蚬进行投喂他莫昔芬喂养料、冷休克+静水压处理、雌激素抑制剂溶液的配制、雌激素抑制剂溶液浸泡、获得雄性河蚬四倍体纯系。通过此方法，可获得100%的河蚬雄性四倍体纯系。此方法，不仅有效地育成河蚬的四倍体，而且提高了四倍体的育成率与出苗率；为生产三倍体不育鱼奠定了坚实的基础。

主权项

河蚬雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬喂养料的配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入到河蚬人工饲养饲料中，制成喂养料，其中他莫昔芬含量为10～20g/500g喂养料，待用；（2）投喂：在母蚬产卵前5～10天，按常规饲料投喂方法对母蚬进行投喂他莫昔芬喂养料，每天两次，早上8：00每100g母蚬投喂10～20g，下午6：00每100g母蚬投喂10～15g；至其卵发育成熟，然后，取公蚬放在一起，使其自然产卵受精，得受精卵，备用；（3）冷休克+静水压处理：在一次卵裂时，采用冷休克与静水压相结合的方法，把步骤（2）中的受精卵放入温度为‑1～1.0℃的冷水中，静水压压力为180～300Kg/cm²，持续时间为3～5min；（4）雌激素抑制剂溶液的配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为80～140mg/l，睾酮的浓度为20～80mg/l；（5）取步骤（3）处理后的受精卵放入按步骤（4）所制备的雌激素抑制剂溶液中，常温浸泡10～30s，然后取出放于孵化池中正常孵化，至受精卵的胚体在担轮幼体期之后脱膜，脱膜后进入面盘幼体期；（6）取步骤（5）中的面盘幼体，投喂氯米芬幼体料；配比量为每kg幼体料加10～15g氯米芬，投喂量为每万只10～20g加有氯米芬的幼体料，直至结束浮游生活后沉入水底；从而获得100%雄性河蚬四倍体纯系。