[发明专利]螺雄性四倍体纯系高效育成方法

摘要

本发明公开了一种螺雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：他莫昔芬喂养料的配备、对母螺进行投喂他莫昔芬喂养料、热休克处理、雌激素抑制剂溶液的配制、雌激素抑制剂溶液泡浴、获得螺的雄性四倍体纯系。通过此方法，可获得100%的螺雄性四倍体纯系。此方法，不仅有效地育成螺的四倍体，而且提高了四倍体的育成率与出苗率，为生产三倍体不育鱼奠定了坚实的基础。

主权项

螺雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬喂养料的配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入到螺人工饲养饲料中，制成喂养料，其中他莫昔芬含量为10～20g/500g喂养料，待用；（2）投喂：在母螺产卵前5～10天，按常规饲料投喂方法对母螺进行投喂他莫昔芬喂养料，每天两次，早上8：00每100g母螺投喂5～10g，下午6：00每100g母螺投喂8～10g；至其卵发育成熟，然后，取公螺放在一起，使其自然产卵受精，得受精怀卵母螺；（3）热休克处理：观察怀卵母螺受精卵的发育情况，在受精卵第一次卵裂前2～3min，把步骤（2）中的怀卵母螺放入溶氧达5～8mg/l、温度为39～42℃恒温水中，热休克3～5min，待用；（4）雌激素抑制剂溶液的配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为100～200mg/l，睾酮的浓度为10～50mg/l；（5）取步骤（3）处理后的怀卵母螺，放入用步骤（4）所制备的雌激素抑制剂溶液中，常温泡浴60～120S，怀卵母螺与溶液比为1：2，通过充氧，使溶液中的氧气含量达5～10mg/l；（6）取步骤（5）处理后的怀卵母螺，放入育苗池中进行常规育苗培育；直至产出幼螺，从而获得100%螺的雄性四倍体纯系。