[发明专利]一种提高鲢、鳙、草鱼四倍体育成率的方法

摘要

本发明公开了一种提高鲢、鳙、草鱼四倍体育成率的方法，包括如下步骤：他莫昔芬抑制剂配备、他莫昔芬注射液的配制、注射处理母本、冷休克+静水压处理、雌激素抑制剂溶液的配制、四倍体纯系的获得。通过此方法，可获得100%的鲢、鳙、草鱼雄性四倍体纯系，不仅有效提高了草、鲢、鳙鱼的四倍体育成率，而且提高了孵化率和出苗率，相比杂交而言，更能获得纯度更高、后代更为稳定的雄性四倍体鱼系。

主权项

一种提高鲢、鳙、草鱼四倍体育成率的方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬抑制剂配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入90%的乙醇溶液进行溶解，制成母液，其中他莫昔芬含量约为30～80mg/ml，待用；（2）他莫昔芬注射液的配制：取上述母液直接加入到已配制好的催产剂溶液中，其比例为1ml他莫昔芬母液加入到200～400ml的已配制好的催产剂溶液中，制成注射液待用；催产剂溶液是将促黄体素释放激素类似物用0.7～0.9%的生理盐水稀释，其中促黄体素释放激素类似物的剂量为0.01～0.02μg/g；（3）注射处理母本：在母本人工产卵前，按常规人工催产方法对母本进行人工注射他莫昔芬注射液，其中他莫昔芬注射液的用量约为40～160μg/kg；（4）冷休克+静水压处理：在一次卵裂时，采用冷休克与静水压相结合的方法，把经过注射处理的母本与不经过任何处理的父本杂交获得的受精卵放入温度为‑1～1.0℃的冷水中，静水压压力为250～340Kg/cm2，持续时间为3～5min；（5）雌激素抑制剂溶液的配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为60～180mg/l，睾酮的浓度为10～50mg/l；（6）四倍体纯系的获得：取步骤（4）处理后的受精卵放入按步骤（5）所制备的雌激素抑制剂溶液中，常温浸泡10～30s，然后取出放于孵化器中正常孵化；从而获得100%鲢、鳙、草鱼雄性四倍体纯系。