[发明专利]大鲵雄性四倍体纯系高效育成方法

摘要

本发明公开了一种大鲵雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：他莫昔芬喂养料的配备、对大鲵母本进行投喂他莫昔芬喂养料、冷休克+静水压处理、雌激素抑制剂溶液的配制、取受精卵放入雌激素抑制剂溶液中常温浸泡、取鱼苗投喂氯米芬幼体料等，通过此方法，可获得100%的大鲵雄性四倍体纯系，有效提高了四倍体的育成率及出苗率，相比杂交而言，能获得纯度更高、后代更为稳定的雄性四倍体鱼系，为不育三倍体大鲵的育成奠定了坚实的基础。

主权项

大鲵雄性四倍体纯系高效育成方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬喂养料的配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入到大鲵常规饲养饲料中，制成喂养料，其中他莫昔芬含量为25～30g/kg喂养料，待用；（2）投喂：在大鲵母本产卵前5～10天，按常规饲料投喂方法对大鲵母本进行投喂他莫昔芬喂养料，每天两次，早上8：00每100g大鲵母本投喂20～25g，下午6：00每100g大鲵母本投喂10～15g；至其卵发育成熟，然后，取雄大鲵放在一起，使其自然产卵交配受精，得受精卵，备用；（3）冷休克+静水压处理：在一次卵裂时，采用冷休克与静水压相结合的方法，把步骤（2）中的受精卵放入温度为‑1～1.0℃的冷水中，静水压压力为180～300Kg/cm2，持续时间为3～5min；（4）雌激素抑制剂溶液的配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为100～160mg/l，睾酮的浓度为40～100mg/l；（5）取步骤（3）处理后的受精卵放入按步骤（4）所制备的雌激素抑制剂溶液中，常温浸泡10～30s，然后取出放于孵化池中正常孵化，至出苗；（6）取步骤（5）中的鱼苗，投喂氯米芬幼体料；配比量为每kg幼体料加10～15g氯米芬，每次投喂量为每万尾30～50g幼体料，每天投喂三次，直至变为乌仔苗；从而获得100%雄性大鲵四倍体纯系。