[发明专利]一种白腐菌分泌锰过氧化物酶培养基及其应用

摘要

本发明公开了一种白腐菌分泌锰过氧化物酶培养基及其制备方法，所述培养基为低氮天冬酰胺‑琥珀酸培养基，所述培养基包括碳源浓度为5～30g/L，氮源浓度为5～30mmol/L，锰离子浓度是26.7～200μmol/L，吐温80浓度为0.25～0.75mL/L，MgSO₄﹒7H2O浓度为0.1～0.4g/L，矿质元素溶液加入量为10～20mL/L，培养液pH值3.5～5.5。本发明利用白腐菌中的木质素降解酶锰过氧化物酶对木质素进行生物降解，最终能把木质素彻底降解为CO₂和H₂O，就从根本上解决了造纸工业的环境污染问题。锰过氧化物酶可以降解木质素及苯酚类物质，还可攻击各种有机污染物包括持久稳固的化学农药、染料脱色等。

主权项

1.一种白腐菌分泌锰过氧化物酶的方法，其特征在于，（1）配制固体培养基PDA，包括马铃薯180～220g，葡萄糖18～22g，琼脂粉18～22g，蛋白胨3～8g，蒸馏水定容至1000mL，pH值自然；（2）在PDA 平皿上将活化好的白腐菌‑猴头菌Hericium erinaceum菌种制成边长8～10mm菌块，将得到的菌块接入低氮天冬酰胺‑琥珀酸培养基中；所述低氮天冬酰胺‑琥珀酸培养基包括葡萄糖浓度为5g/L，蛋白胨浓度为20mmol/L，锰离子浓度是200µmol/L，吐温80浓度为0.25mL/L，MgSO₄﹒7H2O浓度为0.3g/L，矿质元素溶液加入量为15mL/L，培养液pH值4.5；其中，每100 mL的矿质元素溶液包括柠檬酸铁水合物 0.0087g，ZnSO₄·7H₂O 0.01g，MnSO₄·H₂O 0.045g，CoCl₂·6H₂O 0.01g，CuSO₄·5H₂O 0.001g；（3）按照装液量为100mL装瓶，每瓶接种8个菌块，然后在转速200r/min，温度28℃摇床中恒温振荡培养7d，测定锰过氧化物酶活力；（4）发酵罐实验，采用5L发酵罐，装液量3L，接种量 10%，发酵温度28℃，当发酵进行到第 7d 的时候，酶活力达到最大。