[发明专利]乌龟雄性四倍体纯系高效育成的方法

摘要

本发明公开了一种乌龟雄性四倍体纯系高效育成的方法，包括如下步骤：他莫昔芬喂养料的配备、投喂他莫昔芬喂养料、热休克处理、雌激素抑制剂溶液的配制、用雌激素抑制剂溶液均匀喷雾等。通过此方法，可获得100%的乌龟雄性四倍体纯系，不仅有效地育成乌龟的四倍体，而且提高了四倍体的育成率与出苗率；为生产三倍体不育乌龟奠定了坚实的基础。

主权项

乌龟雄性四倍体纯系高效育成的方法，包括如下步骤：（1）他莫昔芬喂养料的配备：取纯度为95%以上的他莫昔芬粉剂，加入到乌龟常规饲养饲料中，制成喂养料，其中他莫昔芬含量为10～16g/500g喂养料，待用；（2）投喂：在母龟产蛋前5～10天，按常规饲料投喂方法对母本进行投喂他莫昔芬喂养料，每天两次，早上8：00每100g乌龟投喂20～30g，下午6：00每100g乌龟投喂10～15g，直至产蛋；（3）热休克处理：把步骤（2）的受精蛋放入温度为27～34℃、湿度为50～90%的恒温孵化器中，在一次卵裂前2～3min，把温度快速升至39～42℃，保持3～5min；然后温度降至29～33℃；（4）雌激素抑制剂溶液的配制：将氯米芬和睾酮一起溶于80%～90%的乙醇中，再加蒸馏水配制成雌激素抑制剂溶液，其中雌激素抑制剂溶液中氯米芬的浓度为180～250mg/l，睾酮的浓度为100～150mg/l；（5）用步骤（4）所制备的雌激素抑制剂溶液，放入喷雾器中，对步骤（3）处理后的受精蛋进行均匀喷雾，用量每100只受精蛋为10～20ml，保持孵化器的温度29～33℃、湿度50～90%，进行孵化；从而获得100%乌龟雄性四倍体纯系。