[发明专利]分子印迹与超声耦合提取灵芝三萜的方法

摘要

本发明公开了一种分子印迹与超声耦合提取灵芝三萜的方法，涉及天然产物的提取分离技术领域。本发明利用分子印迹技术将目标分子作为模版分子，选择在官能团结构上与之相匹配的功能单体，让两者间发生共价作用或非共价作用，再加入交联剂通过热聚合或光聚合，在引发剂的致孔剂的诱发下产生聚合反应，从而形成即分子印迹聚合物（MIPs），随后，利用物理或化学方法，将目标分子从聚合物内部洗脱出来，一次获得具有与目标分子形状相同且官能团位置一定的记忆空穴的原理，无需使用有机溶剂进行长时间的提取，解决了目前灵芝三萜的提取工艺时间长、耗能高、活性成分提取物得率低、残留机溶剂并影响人体健康的问题。

主权项

一种分子印迹与超声耦合提取灵芝三萜的方法，其特征在于：以灵芝粉末作为提取原料，以水作为提取媒介，利用分子印迹材料吸附提取液中的灵芝三萜，再用超声提取设备从提取液中提取吸附有灵芝三萜的分子印迹材料，提取完毕后，洗脱所述分子印迹材料上吸附的灵芝三萜即可；所述分子印迹材料由如下方法制得：A、先将干燥的灵芝进行粉碎，然后加入复合酶溶液，在35～60℃下进行酶解反应1～4h，之后加热灭活复合酶；所述灵芝粉末的用量与所述复合酶的用量，按所述灵芝粉末1g，所述复合酶3mL的比例计算；B、向步骤A所得加入乙醇，使乙醇浓度达40～80%，调节pH为9～10，进行超声处理0.5～1h后分离提取液，所述超声处理频率为20～40MHz，温度为30～90℃；C、重复步骤B的过程1～2次；D、将步骤C所得提取液调节pH为2～5，过树脂进行吸附和洗脱，洗脱液除醇浓缩至原体积的5～20%得浓缩液，加浓缩液3～4倍体积的水搅拌均匀后静置沉淀，将沉淀物干燥得到灵芝三萜；E、取1～1.5mmol灵芝三萜与6mmol甲基丙烯酸溶解在5～10ml氯仿中，置于0℃下保持30min，然后加入15～30mmol二甲基丙烯酸乙二醇酯与15～30mmolN‑异丙基丙烯酰胺和40～100mg偶氮二异丁腈，混合后，通入氮气，搅拌至完全溶解，通氮气10min，封口，在65℃条件反应直至聚合完全，粉碎，过200目筛，用体积比为9：1的甲醇：乙醇混合液洗脱灵芝三萜，即可得到分子印迹材料。