[发明专利]一种缓解过量铜抑制平菇菌丝生长的方法

摘要

本发明公开了一种缓解过量铜抑制平菇菌丝生长的方法，该方法包括以下步骤：菌种活化培养；培养基制作；菌丝生物量测定。在过量铜胁迫的同时，加入适量的海藻糖，可以使菌丝干重比仅过量铜胁迫处理高50％～90％，大大缓解铜胁迫对菌丝生长的抑制。本发明加入海藻糖后，可以使菌丝干重比仅过量铜胁迫处理高50％～90％。

主权项

1.一种缓解过量铜抑制平菇菌丝生长的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、菌种活化培养将低温或液氮保藏的平菇菌种取出，接种在马铃薯‑葡萄糖‑琼脂PDA平板培养基上进行25℃活化培养8d～10d，重复活化2次；然后用打孔器在平板上打取菌块并将菌块接种在含有PDA培养基的平板中央，25℃培养10d；再用相同的打孔器打取菌块；步骤2、培养基制作去皮马铃薯200g，切成0.5cm～1cm的小块，放入盛有800ml煮沸的去离子水的锅中，煮沸10min～15min；然后用4层纱布过滤，在滤液中加入20g的葡萄糖，使之完全溶解；用去离子水定容至1000mL，搅拌混匀备用；然后在250ml容量的三角瓶中加入100ml的上述培养基；在上述三角瓶中加入2.5％～5.0％的海藻糖，以不加海藻糖作为对照，透气膜封口；121℃灭菌30min；冷却至室温后，置于超净工作台中；设置3个处理，分别为对照，即不加硫酸铜溶液；只加硫酸铜溶液；加硫酸铜溶液的同时加海藻糖溶液；在无菌条件下加入100mM的硫酸铜溶液，使培养基中铜离子浓度为1000uM～1500uM；用直径5mm的打孔器在培养8～12d的菌丝平板上打取10个菌种块，然后接入液体培养基中，置于25℃恒温摇床150rpm振荡培养5d；步骤3、菌丝生物量测定将培养好的菌丝用4层纱布过滤，然后用100ml～200ml的去离子水洗涤3～5次，然后在50℃烘至恒重。