[发明专利]一种双层包埋的诸葛菜人工种子制作方法

摘要

本发明公开一种双层包埋的诸葛菜人工种子制作方法，属于生物技术和农业工程领域，本发明所述的方法包括诸葛菜的芽簇诱导、芽繁培养和芽的包埋和人工种子胶囊制备，所述芽的包埋和人工种子胶囊制备过程中内种皮包埋液是含纳米二氧化钛nTiO2、NAA、MS培养基和蔗糖的质量浓度为6％海藻酸钠水溶胶、外种皮包埋液是含有纳米二氧化钛nTiO2、纳米二氧化硅nSiO2的质量浓度为7％或8％海藻酸钠水溶胶。本发明制作的人工种子，可以通过双层包埋技术将杀菌剂和营养物质分离，同时调节内外种皮机械强度；该人工种子在有菌环境下具有生根发芽率高，污染率低，对外植体毒害作用低等特点；利用双层包埋技术可以进一步将诸葛菜人工种子制作技术推向实际生产应用。

主权项

一种双层包埋的诸葛菜人工种子制作方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)，诸葛菜的芽簇诱导：取诸葛菜幼苗,无菌水冲洗，切取腋芽和顶芽，消毒后接种在芽簇诱导培养基上进行芽簇诱导培养；步骤(2)，诸葛菜的芽繁培养：取步骤(1)芽诱导培养的诸葛菜组培苗，切取幼芽，转接到芽繁培养基上进行芽繁培养；步骤(3)，诸葛菜芽的包埋和人工种子胶囊制备：取步骤(2)中在芽繁培养基上生长的幼芽，切取若干个一定长度的芽并逐个放在内种皮包埋液表面，所述内种皮包埋液是含纳米二氧化钛nTiO2、NAA、MS培养基和蔗糖的质量浓度为6％海藻酸钠水溶胶；用玻璃吸管先吸取少量包埋液，再吸入一个诸葛菜芽，然后滴入质量浓度为2％的CaCl2溶液中，络合反应9‑11min形成固态人工种子；用镊子取出所述固态人工种子，放在外种皮包埋液中，使外种皮均匀裹上一层包埋液，所述外种皮包埋液是含有纳米二氧化钛nTiO2、纳米二氧化硅nSiO2的质量浓度为7％或8％海藻酸钠水溶胶；用镊子将人工种子取出，放入质量浓度为2％的CaCl2溶液中，络合反应1.5‑2.5min形成双层包埋的固态人工种子。