[发明专利]一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法

摘要

本发明公开了一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法，其制造方法包括原料采集及筛选、稀释血清制造、备用质控品的保存与监测、质控、持续改进等五个步骤；其使用方法包括储存、复溶、使用三个步骤。本发明的乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法完整、清晰，由于使用的是有多种影响因子的Westgard质控图，准确度高，控制面广，而且因为采用的是31_S质控限，对生产过程中由于技术能力不足导致的基础工艺流程不合理的系统问题非常敏感，有助于保证工艺大方向的正确性及确定良好的工艺基础、优化生产工艺。

主权项

一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造方法，其特征在于包括如下步骤：1）原料采集及筛选：①收集乙肝表面抗原分别为阳性和阴性的血浆或血清，将乙肝阳性血浆或血清和乙肝阴性血浆或血清分开标注，并筛选出无明显溶血、黄疸、脂肪或污染的血浆或血清，作为预备用血浆或血清；②对步骤①筛选过的预备用血浆或血清定感染四项（TPPA、HbSAg、HIV、HCV‑IgG），筛选出结果为阴性的血浆或血清，作为备用血浆或血清；2）稀释血清制造：①将1）获得的备用血浆或血清置于55℃‑60℃环境下，保温0.5‑1h，进行灭活处理；②将步骤①灭活后的血浆或血清进行离心处理，离心转速为3000‑3500r/min，离心时间为5‑10分钟，分别获得乙肝阳性血清和多组乙肝阴性血清；③将每组乙肝阴性血清至少分装5支试管，然后对乙肝阳性血清进行稀释，直至将乙肝阳性血清稀释至标准试剂盒的2‑4倍，获得多组备用质控品；④按步骤③多次反复制造，直至将每组备用质控品按每周使用5次配够一年的剂量；⑤按照标准方法在备用质控品内加入对应浓度的广谱防腐剂；3）备用质控品的保存与监测：①将2）制备的备用质控品分装保存并标记，保存于条件温度不高于‑20℃，湿度不大于10%的环境中；②按每天每组检测一支的频率对备用质控品进行动态跟踪检测，并从第十五天起记录检测结果；4）质控：①将3）中步骤②获得的数据填表并绘图，具体为以临床检验中心的标准质控品作为阴性参照，绘编Westgard多规则质控图，图中采用S/CO作为纵座标、天次作为横座标、31_S为质控限；②均匀性检测：随机抽取10个分装后的样本，对每个样本重复检测1次，进行t分析；随机抽取20个分装后的样本，对每个样本单孔测定，本互对比，进行CV%分析；③稳定性检测：每隔60天，采用3天的结果，每天对质控品重复检测1次，进行方差分析；每隔30天，采用1天的结果，每天对质控品重复检测3次，与上一次检测数据进行进行CV%分析；④抑菌效果检测：取样本2‑3ml进行科学评估，用无菌吸管随机吸取200ul分别平均注入于2块营养琼脂平板，均匀平铺，然后将营养琼脂平板置于35℃‑37℃下培养40‑50h，计数菌落数，计数方法为细菌总数（cfu/ml）=5*（2块平皿菌落数之和/2），进行细菌滋生的风险评估；⑤在整个过程中必须严格防护，防止洗板机异常、标本之间交叉感染、室温下长时放置（大于2h）等异常情况出现；5）持续改进：在统计数据发现异常时立即彻底排查失控原因，总结并改进。