[发明专利]产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌的有效分离方法

摘要

本发明涉及一种稻绿核菌的分离方法，尤其是一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌的有效分离方法。通过稻曲球样本的采集，菌株分离：将采集的稻曲球病粒先用75％酒精浸泡10秒钟，然后放于酒精灯上自燃5秒钟，用无菌滤纸吸干其表面的水分，将表层的组织在无菌操作状态下清理干净，然后用无菌手术刀将稻曲球切开，夹取中间层，接种到浓度为0.05g/L的氯霉素的无菌PSA平板培养基上，接种后的培养皿于28℃恒温培养箱培养，菌株纯化后进行菌株的保存。利用该方法对新鲜采集的单粒黄色、黄绿色或绿色稻曲球的分离成功率约为100％；4℃冰箱保存，保存时间不超过4个月或‑70℃冰箱保存，保存时间不超过1个月的稻曲球的分离成功率达90％以上和80％以上。

主权项

一种产五种稻曲病菌毒素的稻绿核菌的有效分离方法，其方法如下：稻曲球样本的采集：从田间采集的新鲜的单粒黄色、黄绿色或绿色稻曲球；菌株的分离：将采集的稻曲球病粒先用75％酒精浸泡10秒钟，然后放于酒精灯上自燃5秒钟，进行消毒，用无菌滤纸吸干其表面的水分，将表层的组织在无菌操作状态下清理干净，然后用无菌手术刀将稻曲球切开，夹取中间层，接种到浓度为0.05g/L的氯霉素的无菌PSA平板培养基上，每皿接种3个点，每一样品设3个重复，接种后的培养皿于28℃恒温培养箱培养；菌株的纯化：待菌落长出后3‑5天，用尖头挑针挑取黄色或白色小菌落，或者挑取边缘的菌丝移至新鲜配制且已灭菌的PSA平板培养基中，进行反复纯化，并进行菌株的保存。