[发明专利]一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法

摘要

本发明公开了一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法，其制造方法包括原料采集及筛选、稀释血清制造、备用质控品的保存与监测、质控、持续改进等五个步骤；其使用方法包括储存、复溶、使用三个步骤。本发明的乙肝表面抗原血清室内质控品的制造和使用方法完整、清晰，对随机变量敏感、能用来发现随机问题并进行持续改进。由于使用的是最常用的Levery‑Jennings质控图，门槛低，可操作性强，而且因为采用的是1_3S质控限，对生产过程中产生的不可预知的随机问题非常敏感，有助于在生产的同时不断在细节上持续改进、优化生产工艺。

主权项

一种乙肝表面抗原血清室内质控品的制造方法，其特征在于包括如下步骤：1）原料采集及筛选：①收集乙肝表面抗原分别为阳性和阴性的血浆或血清，将乙肝阳性血浆或血清和乙肝阴性血浆或血清分开标注，并筛选出无明显溶血、黄疸、脂肪或污染的血浆或血清，作为预备用血浆或血清；②对步骤①筛选过的预备用血浆或血清定感染四项（TPPA、HbSAg、HIV、HCV‑IgG），筛选出结果为阴性的血浆或血清，作为备用血浆或血清；2）稀释血清制造：①将1）获得的备用血浆或血清置于55℃‑60℃环境下，保温0.5‑1h，进行灭活处理；②将步骤①灭活后的血浆或血清进行离心处理，离心转速为3000‑3500r/min，离心时间为5‑10分钟，分别获得乙肝阳性血清和多组乙肝阴性血清；③将每组乙肝阴性血清至少分装5支试管，然后对乙肝阳性血清进行稀释，直至将乙肝阳性血清稀释至标准试剂盒的2‑4倍，获得多组备用质控品；④按步骤③多次反复制造，直至将每组备用质控品按每周使用10次配够一年的剂量；⑤按照标准方法在备用质控品内加入对应浓度的广谱防腐剂；3）备用质控品的保存与监测：①将2）制备的备用质控品分装保存并标记，保存于条件温度不高于‑20℃，湿度不大于10%的环境中；②按每周每组检测一支的频率对备用质控品进行动态跟踪检测，并从第三周起记录检测结果；4）质控：①将3）中步骤②获得的数据填表并绘图，具体为以临床检验中心的标准质控品作为阴性参照，绘编Levery‑Jennings质控图，图中采用S/CO作为纵座标、周次作为横座标、1_3S为质控限；②均匀性检测：随机抽取10个分装后的样本，对每个样本重复检测1次，进行t分析；随机抽取20个分装后的样本，对每个样本单孔测定，本互对比，进行CV%分析；③稳定性检测：每隔60天，采用3天的结果，每天对质控品重复检测1次，进行方差分析；每隔30天，采用1天的结果，每天对质控品重复检测3次，与上一次检测数据进行进行CV%分析；④抑菌效果检测：取样本2‑3ml进行科学评估，用无菌吸管随机吸取200ul分别平均注入于2块营养琼脂平板，均匀平铺，然后将营养琼脂平板置于35℃‑37℃下培养40‑50h，计数菌落数，计数方法为细菌总数（cfu/ml）=5*（2块平皿菌落数之和/2），进行细菌滋生的风险评估；⑤在整个过程中必须严格防护，防止洗板机异常、标本之间交叉感染、室温下长时放置（大于2h）等异常情况出现；5）持续改进：在统计数据发现异常时立即彻底排查失控原因，总结并改进。