[发明专利]包含多个复合体的新型COCs复合结构组织的制备方法

摘要

本发明公开了一种包含多个复合体的新型COCs复合结构组织的制备方法，利用抽吸或者解剖法，从卵巢卵泡中获得卵丘‑卵母细胞复合体；以卵丘‑卵母细胞复合体为基本材料，采用石蜡包埋的方式，将卵丘‑卵母细胞复合体吸入到EP管中，用软蜡与硬蜡浸泡，吸出注入包埋箱，进行包埋。本发明利用石蜡包埋的方式，构建了一种包含多个复合体的新型COCs复合结构组织；创造性地将传统石蜡组织切片技术用于细胞检测，改善了传统的免疫组织化学染色技术流程，简化了繁杂的脱水程序，显著缩短了检测时间，提升了固定效果，有效地避免了卵巢切片技术中不易切到卵泡与卵母细胞容易丢失的问题；清晰明确地了解卵丘细胞与卵母细胞中的蛋白协同表达情况。

主权项

1.一种包含多个复合体的新型COCs复合结构组织的制备方法，其特征在于，所述包含多个复合体的新型COCs复合结构组织的制备方法利用抽吸或者解剖法，从卵巢卵泡中获得卵丘‑卵母细胞复合体；以卵丘‑卵母细胞复合体为基本材料，采用石蜡包埋的方式，将卵丘‑卵母细胞复合体吸入到EP管中，经固定、水洗、脱水、透明与浸蜡步骤后，进行包埋；该制备方法还包括切片步骤，具体为：将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，贴到载玻片上，放恒温箱中烘干；用二甲苯脱蜡，100％乙醇孵育；滴加5％二抗来源封闭血清，湿盒内室温封闭30分钟；一抗湿盒内4℃冰箱过夜孵育；二抗于暗盒室温孵育1h后，漂洗。