[发明专利]一种蜂蜜中新烟碱类杀虫剂的高效检测方法

摘要

本发明公开一种蜂蜜中新烟碱类杀虫剂的高效检测方法，包括如下步骤(1)标准溶液配制；(2)待测样处理；(3)在线固相萃取；(4)高效液相色谱‑静电场轨道阱高分辨质谱测定。本发明采用高效、重复性好的在线固相萃取方法结合高效液相色谱串联静电场轨道阱高分辨质谱测定蜂蜜中新烟碱类杀虫剂，可实现对样品中新烟碱类杀虫剂的定性和定量测定，检测结果灵敏可靠；采用本方法，样品的前处理过程快速简便，提高工作效率；本方法中，根据新烟碱类药物的特性，选择适当的萃取溶剂、清洗剂和洗脱剂以及适当的质谱检测参数，提高检测精度和可靠度。

主权项

一种蜂蜜中新烟碱类杀虫剂的高效检测方法，其特征在于包括如下步骤：（1）标准溶液配制：将新烟碱类药物标准品用甲醇配制成浓度为0.8~1.2 mg/mL的标准溶液，2~6℃保存；再用甲醇逐级稀释成浓度为0.8~1.2 μg/mL的标准溶液；（2）待测样处理：将待测蜂蜜样品搅匀，并称取0.5~1.5 g置于50 mL离心管中，加入pH 为7~8的磷酸盐缓冲液12~18mL，涡旋，充分溶解均匀；置于超声仪中超声15~30 min；过滤，取滤液至进样小瓶；（3）在线固相萃取：采用HLB萃取柱，用甲醇和水分别进行活化，流速为4~6 mL/min；然后进样，上样量为0.3~0.8 mL，上样溶剂为0.4~0.6 mL的水，流速为0.4~0.6 mL/min；清洗溶剂为水，体积0.5~1.5 mL，流速为4~6 mL/min；洗脱溶剂为甲醇，体积0.3~0.7 mL，流速0.10~0.20 mL/min；（4）高效液相色谱‑静电场轨道阱高分辨质谱测定：采用加热的电喷雾离子源（HESI‑Ⅱ）；毛细管温度为300~400 ℃，鞘气流速45~55 L/min，辅助气流速5~7 L/min，吹扫气流速3~5 L/min；喷雾电压为3 KV，透镜电压为50V；采用正离子模式采集数据；进样前将色谱柱平衡15~30 min，在柱温为25~35 ℃下重复进同一浓度的标准溶液，当峰面积变化在±10%以内，保留时间在±5%以内，开始正式进样；进样系列标准溶液浓度为5~150 ng/mL，以标准溶液峰面积为纵坐标，溶液浓度为横坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中药物的响应值在仪器测定的线性范围内；所述的新烟碱类药物包括吡虫啉、噻虫胺、啶虫脒、氟啶虫酰胺、噻虫嗪、噻虫啉、呋虫胺和烯啶虫胺；所述步骤（4）中采用的色谱柱为Agilent Polaris C‑18，长度为100 mm，内径为2.1mm，填料内径为5 μm；所述步骤（4）中采用梯度洗脱程序，流动相为醋酸铵与甲醇的混合液；所述的梯度洗脱程序具体如下：时刻0 min：采用95 wt%的醋酸铵和5 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min；时刻2 min：采用95 wt%的醋酸铵和5 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min；时刻4 min：采用5 wt%的醋酸铵和95 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min；时刻8 min：采用5 wt%的醋酸铵和95 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min；时刻9 min：采用95 wt%的醋酸铵和5 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min；时刻11 min：采用95 wt%的醋酸铵和5 wt %的甲醇混合液做流动相，流速为0.3 mL/min。