[发明专利]番鸭细小病毒病毒样颗粒的制备方法在审
| 申请号： | 201610520454.0 | 申请日： | 2016-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN106350491A | 公开（公告）日： | 2017-01-25 |
| 发明（设计）人： | 朱善元;王安平;吴萌;王永娟;左伟勇;吴双;郭长明;秦枫;洪伟鸣 | 申请（专利权）人： | 朱善元;王安平 |
| 主分类号： | C12N7/04 | 分类号： | C12N7/04;C12N15/866 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225300 江苏省泰州市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种番鸭细小病毒病毒样颗粒的制备方法。该方法将番鸭细小病毒VP3基因克隆入杆状病毒转移载体获得重组转移载体pFastBac1‑VP3；将pFastBac1‑VP3重组质粒转化DH10Bac感受态细胞，涂板培养，直至蓝白斑出现；挑取白色单菌落，以碱裂法提取重组Bacmid DNA，将重组Bacmid DNA转染生长昆虫细胞Sf9制得重组杆状病毒；SDS‑PAGE、Western blot、IFA结果均显示重组蛋白VP3在昆虫细胞中成功表达；以P3代病毒感染昆虫细胞，收集细胞裂解液上清，经蔗糖密度梯度离心纯化后，可见直径约20～25nm的球形病毒样颗粒，与DPV天然病毒高度相似。 | ||
| 搜索关键词： | 细小 病毒 颗粒 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种番鸭细小病毒病毒样颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将番鸭细小病毒VP3基因克隆到载体pFastBac1中，构建转移载体pFastBac1‑VP3；(2)pFastBac1‑VP3重组质粒的转座(3)重组Bacmid DNA的获得(4)重组杆状病毒的制备(5)病毒样颗粒的制备。
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