[发明专利]一种酶水解与氧化裂解联用制备罗汉果醇和11-氧化-罗汉果醇的方法有效
申请号: | 201610521201.5 | 申请日: | 2016-06-29 |
公开(公告)号: | CN105950695B | 公开(公告)日: | 2019-06-11 |
发明(设计)人: | 王磊;李炳辰;羊学荣;符毓夏;李典鹏 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 |
主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 杨立;付倩 |
地址: | 541006 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种酶水解与氧化裂解联用制备罗汉果醇和11‑氧化‑罗汉果醇的方法,属于药物前体或保健品技术领域。该方法包括如下步骤:步骤一:酶水解罗汉果皂苷V;步骤二:smith降解:(1)高碘酸钠氧化开裂;(2)硼氢化钠还原;(3)水解。本发明联用酶水解和氧化裂解两种方法,首先利用酶水解掉罗汉果皂苷V的部分糖残基,降低糖链的复杂度,再用氧化裂解的方法最终制备罗汉果醇和11‑氧化‑罗汉果醇两种罗汉果皂苷元。本发明的方法,适用于大量样品的制备,产率高,而且可以同时获得罗汉果醇和11‑氧化‑罗汉果醇两种苷元。 | ||
搜索关键词: | 一种 水解 氧化 裂解 联用 制备 罗汉果 醇和 11 方法 | ||
【主权项】:
1.一种酶水解与氧化裂解联用制备罗汉果醇和11‑氧化‑罗汉果醇的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一:酶水解罗汉果皂苷V取水解酶,溶于水中,所述水解酶与水的质量比例为1:100,取上清液,调节pH=2‑6,得到酶解液;取罗汉果皂苷V,采用所述酶解液溶解,所述罗汉果皂苷V与所述酶解液的质量比例为1:50‑100,反应12‑24h,加乙醇终止反应,过滤后,得到混合皂苷溶液;所得混合皂苷溶液经HPLC检测,混合皂苷溶液中的罗汉果皂苷V含量≥30%,则重复步骤一,直到混合皂苷溶液中的罗汉果皂苷V含量<30%;步骤二:smith降解(1)高碘酸钠氧化开裂在步骤一得到的混合皂苷溶液中,加入混合皂苷溶液体积1‑3%的醋酸,搅拌下缓慢加入高碘酸钠溶液,所述罗汉果皂苷V与所述高碘酸钠摩尔比例为1:2‑5,避光在20‑80℃下搅拌反应,得到高碘酸钠氧化开裂后的反应液;(2)硼氢化钠还原蒸干步骤(1)得到的高碘酸钠氧化开裂后的反应液,残渣中加入乙醇,过滤溶液,滤液中缓慢加入硼氢化钠固体,所述罗汉果皂苷V与硼氢化钠的摩尔量比例为1:5‑10,搅拌反应5‑12h,得到硼氢化钠还原后的反应液;(3)水解在步骤(2)得到的硼氢化钠还原后的反应液中,加入水稀释,所述反应液与水的体积比例为1:0.5‑1:2,加酸调节pH=1,20‑60℃水浴搅拌2‑8h,加碱调节pH=6‑7,蒸出乙醇,用乙酸乙酯萃取,萃取次数≥1次,合并乙酸乙酯相,蒸干乙酸乙酯后,采用硅胶柱层析分离,分别得到所述罗汉果醇和11‑氧化‑罗汉果醇。
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