[发明专利]一种从氨糖发酵液中分离提取N-乙酰基-D-氨基葡萄糖和D-氨基葡萄糖的方法

摘要

本发明公开了从氨糖发酵液中分离提取N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖和D‑氨基葡萄糖的方法，包括微滤、超滤、纳滤等步骤，将发酵液经0.1‑10μm的微滤膜过滤去除杂质颗粒和微生物菌体，通过0.001‑0.1μm的超滤膜过滤去除蛋白质、核酸、胶体颗粒大分子等杂质，通过反渗透系统去除色素、多肽、核苷酸等小分子杂质；从含N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖和氨基葡萄糖的发酵滤液中结晶分离N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖，包括加热浓缩发酵滤液、加入晶种、控温结晶、N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖晶体收集、残留氨基葡萄糖回收等步骤。该方法成本低，对N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖结构无影响，所得N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖纯度高。

主权项

1.一种从氨糖发酵液中分离提取N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖和D‑氨基葡萄糖的方法，其特征在于，（1）发酵液的预处理：将含有N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖和氨基葡萄糖的发酵液通过孔径为0.1‑10 μm的微滤膜进行过滤，去除发酵液中的杂质颗粒和微生物菌体，得到粗提液；微滤过程的操作压力为0.1‑1.0 MPa，操作温度为10‑40℃，浓缩倍数为2‑40倍；（2）发酵液中大分子杂质的去除：将粗提液采用孔径为0.001‑0.1μm的超滤膜进行过滤，去除发酵液中残存的蛋白质、核酸、多糖、胶体颗粒大分子等杂质，得到澄清的滤液；超滤工作压力为0.15‑2.5 MPa，操作温度为10‑40℃，浓缩倍数为2‑40倍；（3）经过微滤、超滤得到的滤液再经过反渗透，去除色素、多肽、核苷酸、水分或小分子杂质，并起到初步的浓缩作用；进一步再采用加热浓缩、逐步降温结晶的方法，从含N‑乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖的滤液中分离出N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖，最终通过去乙酰化处理回收结晶母液中残留的氨基葡萄糖；所得发酵滤液通过控制降温速率1‑5℃/h，降温至5‑20℃时，加入溶液质量0.1%‑5%的N‑乙酰氨基D‑葡萄糖晶种，使N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖结晶，控制恒温和低速搅拌结晶10‑50 h后，过滤收集晶体；分离所得晶体在40‑80℃烘干至恒重；所述发酵滤液经过结晶后剩余部分N‑乙酰基‑D‑氨基葡萄糖和氨基葡萄糖，通过去乙酰化反应处理，成为氨基葡萄糖；反应液进行煮沸浓缩，过饱和溶液通过控制缓慢降温结晶，收集氨基葡萄糖晶体。