[发明专利]一种香蕉枯萎病病原菌致病性鉴定方法

摘要

本发明公开了一种香蕉枯萎病病原菌致病性鉴定方法，该方法包括以下步骤：（1）致病菌的培养及孢子悬浮液的制备；（2）用具的消毒及灭菌；（3）香蕉假茎切段；（4）接种；（5）培养；（6）致病性观察。本发明方法能对病原菌致病性实现简易、快速、直观的快速鉴定，可大幅度地提高工作效率，为植物病害的防治做出重要作用。此外还具有以下优点：香蕉维管束变褐症状明显，直观性强，易判断；保湿性好，发病快，1周左右可知结果；接种量均匀，发病一致性强；简单易操作，无需额外增添贵重仪器或材料；数据稳定好，重复性强；同期可进行大批量病原菌致病性的鉴定；对类似的维管束性病原菌的致病性鉴定也有重要的参考作用。

主权项

一种香蕉枯萎病病原菌致病性的鉴定方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）致病菌的培养及孢子悬浮液的制备：将待测病菌接种在PDA培养基上，28℃恒温箱中培养6天；刮取培养物，用无菌水配制成浓度1×10⁵CFU/mL孢子悬浮液，备用；（2）用具的消毒及灭菌：取厚度2mm的PU海绵，剪成Ａ4纸规格的长方形，灭菌，获得无菌海绵；准备规格为16×40cm的带盖塑料箱，表面消毒，备用；（3）香蕉假茎切段：将新鲜香蕉假茎表面消毒，然后用无菌刀切成长度5cm的香蕉假茎段；（4）接种：将无菌海绵浸入步骤（1）制备的孢子悬浮液中，使得海绵充分吸收孢子悬浮液，然后取出海绵，将海绵平铺在步骤（2）经消毒的塑料箱底部，然后将步骤（3）的香蕉假茎段底部切面朝下至于塑料箱中的海绵上；再取另一张吸收了孢子悬浮液的无菌海绵覆盖在香蕉假茎段的顶部；（5）培养：合上塑料箱盖，将塑料箱放置在28‑30℃的室内环境中培养6天；（6）致病性观察与测量：培养结束后，打开塑料箱盖，移开覆盖在香蕉假茎段顶部的海绵，观察到香蕉假茎的维管束变褐，则说明该待测病原菌具有致病性；对比香蕉假茎的维管束变褐程度来判断该待测病原菌致病性的强弱；所述待测病原菌为香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型（Fusarium oxysporium f.sp. cubense Race 4）。