[发明专利]酶偶联核酸-银纳米的探针在检测D-氨基酸的应用

摘要

本发明公开了一种酶偶联核酸‑银纳米的探针在检测D‑氨基酸的应用，包括如下步骤：按体积比1：1‑10的比例：取D‑氨基酸水溶液与酶偶联核酸‑银纳米探针，混合均匀，37℃恒温30～60min，用荧光分光光度计在激发波长568nm，发射波长为620nm的条件下测定。(1)用本发明的酶偶联核酸‑银纳米的探针能对食品中的D‑氨基酸进行检测，检测下线可达到10nm；(2)与传统的检测方法相比，样品无需进行衍生化，操作简单、降低成本，实现D‑氨基酸的快捷、方便的检测。选择性好、特异性高。

主权项

1.酶偶联核酸‑银纳米的探针在检测D‑氨基酸的应用，其特征是包括如下步骤：按体积比1：1‑10的比例：取D‑氨基酸水溶液与酶偶联核酸‑银纳米探针，混合均匀，37℃恒温30～60min，用荧光分光光度计在激发波长568nm，发射波长为620nm的条件下测定；所述酶偶联核酸‑银纳米探针，是用下述方法制成：(1)分别用磷酸盐缓冲溶液为溶剂配制0.1‑0.5mM寡聚核苷酸溶液，配制0.7‑3.5mM的硝酸银溶液和配制0.7‑3.5mM硼氢化钠溶液；(2)取50μL所述寡聚核苷酸溶液和50μL硝酸银溶液，混合均匀，加入4.85mL的磷酸盐缓冲溶液，搅拌15‑25min，加入50μL硼氢化钠溶液，搅拌50‑90min；所述寡聚核苷酸、硝酸银和硼氢化钠的摩尔比为：1:7:7；(3)向步骤(2)获得的液体中加入0.56mL的0.5‑5.0mM的FeSO4水溶液，加入25‑40μL的100000U/L D‑氨基酸氧化酶水溶液，震荡混匀；所述磷酸盐缓冲溶液的浓度为20mM，pH为6.8；所述寡聚核苷酸序列为5ˊ–CCCTTAATCCCC–3ˊ。