[发明专利]利用实时定量PCR快速鉴定棉花黄萎病抗性的方法有效
申请号: | 201610528387.7 | 申请日: | 2016-07-06 |
公开(公告)号: | CN106011269B | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
发明(设计)人: | 冯鸿杰;赵丽红;朱荷琴;冯自力;李志芳;师勇强 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院棉花研究所 |
主分类号: | C12Q1/6851 | 分类号: | C12Q1/6851 |
代理公司: | 11318 北京法思腾知识产权代理有限公司 | 代理人: | 高宇 |
地址: | 455000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明涉及棉花黄萎病抗性鉴定领域,具体涉及利用实时定量PCR快速鉴定棉花黄萎病抗性的方法。所述方法包括以下步骤:1)棉花幼苗的培养及接菌;2)棉苗根部组织DNA的提取;3)实施定量(Q‑PCR)分析;4)棉花品种抗病性评价。本发明的方法能够更加快速、准确、高效的鉴定品种的抗病性,在抗病品种分子辅助选择中有很好的应用前景。 | ||
搜索关键词: | 利用 实时 定量 pcr 快速 鉴定 棉花 黄萎病 抗性 方法 | ||
【主权项】:
1.利用实时定量PCR快速鉴定棉花黄萎病抗性的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:/n(1)待鉴定棉花品种幼苗的培养及接菌/n将经过消毒处理的种子,播种于蛭石和沙土体积比为6:4的基质中,待两片子叶长成时移栽到装有棉花营养液的水培盆中,采用定量浸根法接种棉花黄萎病病菌;/n(2)棉苗根部病菌定殖量检测/n取接菌1天后的待鉴定棉花品种的根,提取棉花根部基因组DNA,以特异性引物Vdβt-F:AACAACAGTCCGATGGATAATTC,Vdβt-R:GTACCGGGCTCGAGATC进行荧光定量PCR反应;/n(3)棉花品种抗黄萎病性评价/n依据棉花根部DNA中黄萎病菌的DNA含量评价棉花品种抗黄萎病性,评价标准为:0-1pgng
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