[发明专利]酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其表达载体和应用在审
申请号: | 201610528933.7 | 申请日: | 2016-07-06 |
公开(公告)号: | CN106119219A | 公开(公告)日: | 2016-11-16 |
发明(设计)人: | 肖志壮;张稳 | 申请(专利权)人: | 青岛红樱桃生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;A23K20/189;C12R1/84 |
代理公司: | 青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙) 37236 | 代理人: | 单虎 |
地址: | 266001 山东省青岛市高新区*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其表达载体和应用。本发明以根据巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏好性进行过优化的葡萄糖氧化酶为基础,使用易错PCR 方法对该酶基因进行突变,再通过高通量筛选方法挑选出正突变,经过两轮易错PCR和之后的理性设计,最终获得4个酶活显著提高的突变体,分别为GOD‑M01、GOD‑M02、GOD‑M03和GOD‑M04,其酶活与原始基因相比,分别提高了47%、55%、83%和117%。 | ||
搜索关键词: | 活性 提高 葡萄糖 氧化酶 突变体 及其 表达 载体 应用 | ||
【主权项】:
一种酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体GOD‑M02,其特征在于,所述的葡萄糖氧化酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示,所述的葡萄糖氧化酶突变体GOD‑M02由氨基酸序列为SEQ ID NO:1的葡萄糖氧化酶的第288位氨基酸由谷氨酸变为赖氨酸获得。
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