[发明专利]酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其表达载体和应用在审

专利信息
申请号: 201610528933.7 申请日: 2016-07-06
公开(公告)号: CN106119219A 公开(公告)日: 2016-11-16
发明(设计)人: 肖志壮;张稳 申请(专利权)人: 青岛红樱桃生物技术有限公司
主分类号: C12N9/04 分类号: C12N9/04;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;A23K20/189;C12R1/84
代理公司: 青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙) 37236 代理人: 单虎
地址: 266001 山东省青岛市高新区*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提供了酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其表达载体和应用。本发明以根据巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)的密码子偏好性进行过优化的葡萄糖氧化酶为基础,使用易错PCR 方法对该酶基因进行突变,再通过高通量筛选方法挑选出正突变,经过两轮易错PCR和之后的理性设计,最终获得4个酶活显著提高的突变体,分别为GOD‑M01、GOD‑M02、GOD‑M03和GOD‑M04,其酶活与原始基因相比,分别提高了47%、55%、83%和117%。
搜索关键词: 活性 提高 葡萄糖 氧化酶 突变体 及其 表达 载体 应用
【主权项】:
一种酶活性提高的葡萄糖氧化酶突变体GOD‑M02,其特征在于,所述的葡萄糖氧化酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示,所述的葡萄糖氧化酶突变体GOD‑M02由氨基酸序列为SEQ ID NO:1的葡萄糖氧化酶的第288位氨基酸由谷氨酸变为赖氨酸获得。
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