[发明专利]一种单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤的方法

摘要

本发明提供一种单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤的试剂盒及方法，该方法包括铺胶、裂解、解旋、电泳、中和洗涤、干燥、染色，再采用荧光显微镜观察染色结果并拍摄照片，分析评价细胞DNA的损伤程度。传统的单细胞凝胶电泳技术在样品制备时需在载玻片上铺制三层凝胶，具有操作复杂、容易脱胶、样品图像不清晰等缺点，而本发明只需在载玻片上铺制一层胶，具有样品制备工艺简单、脱胶率低、易于操作和实验成本低等优点。

主权项

1.一种单细胞凝胶电泳检测细胞DNA损伤的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)铺胶：在载玻片上铺设盖玻片，且形成以载玻片为底面、盖玻片为侧壁的小槽，即微电泳槽；粘接盖玻片时采用的胶水为UFO强力胶水或AB胶，保持盖玻片与载玻片之间存在间隙，将DNA样品悬液与低熔点琼脂糖凝胶混匀得细胞混合液，采用所述细胞混合液在电泳槽中铺胶，使微电泳槽上的细胞混合液在凝固前渗入两侧的间隙中，微电泳槽上凝胶的两侧被固定，有效防止脱胶；2)裂解：将铺胶后的载玻片浸入细胞裂解液中裂解；3)解旋、电泳、中和洗涤：将裂解后的载玻片浸入碱性电泳缓冲液中解旋，解旋完毕后电泳，电泳结束后，中和洗涤载玻片；4)干燥：将中和洗涤之后的载玻片干燥；5)染色：琼脂圈染色、干燥后，分析评价细胞DNA的损伤程度。