[发明专利]一种NKT细胞培养方法有效
申请号: | 201610532223.1 | 申请日: | 2016-07-07 |
公开(公告)号: | CN106190973B | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
发明(设计)人: | 徐榕;王立燕 | 申请(专利权)人: | 北京景达生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 北京慧尚知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11743 | 代理人: | 吉海莲 |
地址: | 102600 北京市大兴区中关村科技*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种新型的NKT细胞培养方法,该方法包括NKT原代细胞培养和NKT细胞继代培养,所述NKT原代细胞培养是采用外周血单个核细胞接种无血清培养基,所述继代培养的第一天向无血清培养基中加入启动因子人源化的CD3单抗、人源化的CD28单抗和IL‑2;随后在后续的扩增液中加入扩增因子IL‑2和IL‑7。本发明公开的NKT细胞培养方法培养的NKT细胞,细胞状态好、增殖速度快、增殖倍数高,可以获得更高纯度的NKT效应细胞,得到的NKT细胞杀伤效果也明显高于现有的培养方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 新型 nkt 细胞培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种NKT细胞培养方法,该方法包括NKT原代细胞培养和NKT细胞继代培养,所述NKT原代细胞培养是采用0.5‑2×106个/mL的细胞密度将外周血单个核细胞接种于含有终浓度为500‑2000IU/mL IFN‑γ的无血清培养基,其特征在于,所述继代培养的第一天向无血清培养基中加入终浓度为50‑500ng/mL的人源化CD3单抗、终浓度为50‑500ng/mL的人源化CD28单抗和终浓度为2000‑5000IU/mL的IL‑2作为启动因子;随后在后续的培养体系扩增中加入含有扩增因子IL‑2和IL‑7的无血清培养基作为扩增液,其中所述IL‑2的终浓度为500‑1000IU/mL,且IL‑7的终浓度为10‑50ng/mL。
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