[发明专利]一种重组荞麦谷氧还蛋白及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201610536725.1 | 申请日： | 2016-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN106119217B | 公开（公告）日： | 2019-07-23 |
| 发明（设计）人： | 王宏飞;张新瑀;王文明;王转花 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种重组荞麦谷氧还蛋白及其制备方法和应用。制备方法：将重组荞麦谷氧还蛋白(rbGrx)基因构建到pGEX‑6p‑1载体上，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，诱导表达连接有GST的融合蛋白；酶切后使用阴离子交换柱与凝胶柱进一步纯化，获得纯度98％以上的重组rbGrx蛋白。进而在pH 4.5，22％PEG3350(W/V)和0.1M CH3COONa的结晶化条件下,培养获得rbGrx蛋白与谷胱甘肽(GSH)复合物晶体，并利用X射线单晶衍射的方法测定其结构，可清晰分辨出与催化活性相关的重要氨基酸残基，从而可以有目的地调控其稳定性及酶的活力。本发明重组荞麦谷氧还蛋白具有高的巯基转移酶活性，酶比活力为300U/mg。其可在催化巯基转移反应中应用，其晶体及其结构在医疗保健和食品开发等方面也具有实用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 荞麦 谷氧还 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种重组荞麦谷氧还蛋白rbGrx的编码基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1。
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