[发明专利]一种柚子种质花粉的超低温保存方法有效
| 申请号： | 201610537107.9 | 申请日： | 2016-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN106172378B | 公开（公告）日： | 2019-12-06 |
| 发明（设计）人： | 张金梅;陈晓玲;卢新雄;辛霞;尹广鹍;何娟娟 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | A01N3/00 | 分类号： | A01N3/00 |
| 代理公司： | 11002 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人： | 王文君<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及植物超低温保存方法，具体涉及一种柚子种质花粉的超低温保存方法，包括如下步骤：(1)花粉干燥：将花粉干燥至含水量为10～20％；(2)花粉冻存：将干燥后的花粉密封包装，置于液氮中保存；(3)花粉复苏：将花粉从液氮中取出，在25～37℃条件下化冻5～15min；(4)花粉回湿0～3h；(5)离体萌发。本发明优化并明确了适宜柚子种质花粉的超低温保存关键要素，如含水量范围、化冻条件、回湿条件、离体萌发条件等。通过对上述条件的优化和限定，显著提高了柚子种质花粉超低温保存后的萌发率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 柚子 种质 花粉 超低温 保存 方法 | ||
【主权项】：
1.一种柚子种质花粉的超低温保存方法，其特征在于，为如下(一)或(二)：/n(一)当柚子种质花粉为左氏柚种质花粉时，所述方法包括如下步骤：/n(1)花粉干燥：将花粉干燥至含水量为10～20％；/n(2)花粉冻存：将干燥后的花粉密封包装，置于液氮中保存；/n(3)花粉复苏：将花粉从液氮中取出，在37℃条件下化冻5min；/n(4)花粉回湿：取复苏后的花粉于安培瓶中，将安培瓶置于含有过饱和硫酸铜的密闭容器中，室温下回湿2～3h；/n(5)离体萌发：将回湿后的花粉置于含有100-150g/L蔗糖，0.1g/L硼酸，0.1g/L硝酸钾，0.3-1.0g/L硝酸钙，0.0-0.3g/L硫酸镁，10g/L琼脂的花粉离体萌发培养基上25℃暗培养16～20h；/n(二)当柚子种质花粉为夔柚种质花粉时，所述方法包括如下步骤：/n(1)花粉干燥：将花粉干燥至含水量为10％；/n(2)花粉冻存：将干燥后的花粉密封包装，置于液氮中保存；/n(3)花粉复苏：将花粉从液氮中取出，在37℃条件下化冻5min；/n(4)花粉回湿：取复苏后的花粉于安培瓶中，将安培瓶置于含有过饱和硫酸铜的密闭容器中，室温下回湿2～3h；/n(5)离体萌发：将回湿后的花粉置于含有150g/L蔗糖，0.1g/L硼酸，0.1g/L硝酸钾，1.0g/L硝酸钙，0.3g/L硫酸镁，10g/L琼脂的花粉离体萌发培养基上25℃暗培养16～20h。/n
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