[发明专利]一种重组蛋白质的纯化方法

摘要

本发明公开了一种来源于CHO细胞的重组人透明质酸酶的纯化方法，所述方法包括如下步骤：将含有重组人透明质酸酶的CHO细胞培养液通过微滤澄清、超滤浓缩换液后，依次经过高流速季铵琼脂糖凝胶阴离子层析柱、高效苯基交联琼脂糖凝胶层析柱、陶瓷羟基磷灰石I型层析柱和高效磺酸基琼脂糖凝胶阳离子层析柱，获得了纯度大于98％，比活性在1.1×10⁵U/mg以上的重组人透明质酸酶。该方法适合于规模化制备重组人透明质酸酶。

主权项

一种从细胞培养液中纯化重组蛋白质的方法，所述方法包括：(1)收集含有目的蛋白质的细胞培养液；(2)使所述细胞培养液流过离子交换层析柱，固定目的蛋白质，并使杂质蛋白质流过，之后采用等度洗脱方法，收集洗脱峰；(3)使步骤(2)获得的含有目的蛋白质的培养液流过疏水作用层析柱，使杂质蛋白质流过，并固定目的蛋白，之后采用等度洗脱方法，收集洗脱峰；(4)将步骤(3)获得的含有目的蛋白质的培养液流过羟基磷灰石层析柱，固定目的蛋白质，并使杂质蛋白质流过，之后采用等度洗脱方法，收集洗脱峰；(5)使步骤(4)获得的含有目的蛋白质的培养液流过亲和层析柱，固定目的蛋白质，并使杂质蛋白质流过，之后采用等度洗脱方法，收集洗脱峰；(6)将收集的洗脱峰置换于缓冲液中保存。