[发明专利]一种检测肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素基因的引物、探针、方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201610539447.5 | 申请日： | 2016-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN105950772A | 公开（公告）日： | 2016-09-21 |
| 发明（设计）人： | 王伟建;倪剑锋;孙小燕;翁毅 | 申请（专利权）人： | 宁波基内生物技术有限公司;王伟建 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
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| 地址： | 315201 浙江省宁波市镇*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物学技术领域，公开了一种检测肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素基因的引物、探针、方法及试剂盒，采用Taqman探针实时荧光PCR法，分别针对phoE基因、KPC基因、内标基因(int)保守区设计引物和荧光标记探针。phoE、KPC基因探针5’端均标记荧光报告基团FAM，3’端均标记荧光淬灭基团TAMRA，int基因5’端均标记荧光报告基团JOE，3’端均标记荧光淬灭基团BHQ1。引物、探针配成PCR检测混合液后，加入酶与样本核酸，选用荧光PCR仪上的FAM通道对phoE基因、KPC基因进行扩增，选用JOE通道对int基因进行扩增，通过荧光信号的变化实现目的基因的检测。本发明具有准确率高、特异性强、灵敏度高的特点，能够对痰液和咽拭子样本中的肺炎克雷伯菌和KPC进行快速、准确检测。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 肺炎 克雷伯菌耐碳 青霉 抗生素 基因 引物 探针 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种检测肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素基因的引物和探针，其特征在于，检测肺炎克雷伯菌外膜磷酸蛋白基因phoE的引物核苷酸序列如SEQIDNO：2～3所示，检测肺炎克雷伯菌外膜磷酸蛋白基因phoE的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；检测耐碳青霉烯类抗生素基因KPC的引物核苷酸序列如SEQIDNO：6～7所示，检测耐碳青霉烯类抗生素基因KPC的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：8所示；检测内标基因int的引物核苷酸序列如SEQIDNO：10～11所示，检测内标基因int的Taqman探针的核苷酸序列如SEQIDNO：12所示。
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