[发明专利]一种乌龙头快速繁殖的方法

摘要

本发明属于植物生物技术领域。通过培养基的设计，实现乌龙头的嫩茎幼叶的脱分化，愈伤组织大量分化胚状体，胚状体高效分化成幼苗和生根壮苗。其过程包括将乌龙头外植体接种于脱分化培养基中，愈伤诱导率100%，转至诱导愈伤组织分化胚状体培养基中，经过三次继代，胚状体增殖第三次胚状体增殖系数达11.337；转至胚状体分化成苗培养基上，培养60天，苗分化倍数3.889；转至生根壮苗培养基上，培养45天，生根率98.6%，平均根长11.5 cm，平均主根数3.2条。本发明方法培养周期较短，使用原材料少，可以有效保护野生资源、节约培养基成本、人工成本，适合乌龙头大规模种植。

主权项

1.一种乌龙头快速繁殖方法，包括外植体诱导出愈伤、愈伤组织诱导分化成胚状体、胚状体诱导分化为健壮小苗、小苗诱导生根，其特征在于，是以乌龙头的嫩茎与幼叶为外植体，具体步骤为：（1）外植体诱导出愈伤：将表面消毒的乌龙头嫩茎与幼叶接种至外植体脱分化培养基上，培养条件25℃，光照2000Lx，12小时/天，愈伤诱导率为100%；所述脱分化的培养基为MS+2,4‑D 1.5 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L；pH5.8；（2）愈伤组织诱导分化成胚状体：将步骤（1）获得的愈伤组织转至诱导愈伤组织分化为胚状体培养基上，培养条件25℃，光照2000Lx，12小时/天，继代三次，每次45天，第三次胚状体增殖系数11.337；所述诱导愈伤组织分化为胚状体培养基为MS+6‑BA 0.5 mg/L+NAA 0.4 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭2 g/L；pH5.8；（3）胚状体诱导分化为幼苗：将步骤（2）获得的胚状体转至胚状体分化成苗培养基上，培养条件25℃，光照2000Lx，12小时/天，培养60天，苗分化倍数3.889；所述胚状体分化成苗培养基为MS+ZT 1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖30g/L+活性炭2 g/L；pH5.8；（4）诱导生根壮苗：将步骤（3）获得的小苗转至生根壮苗培养基上，培养条件25℃，光照2000Lx，12小时/天，培养45天，生根率98.6%,平均根长11.5cm，平均主根数3.2条；所述生根壮苗培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭2 g/L；pH5.8。