[发明专利]研究人体无精症和严重少精症快速检测的方法及应用其方法的试剂盒

摘要

本发明涉及一种人体无精症和严重少精症检测方法的研究，提供了一种研究人体无精症和严重少精症快速测试的方法，包括：样品收集，样品处理及利用real‑time PCR平台诊断和利用样品处理的结果进行ELISA检测。本发明还提供应用上述方法的试剂盒，该试剂盒包含上述样品处理后提取的RNAs和组织代谢物。本发明提供的研究方法帮助人体无精症和严重少精症患者快速检测及诊断，本发明提供的试剂盒可以帮助患者更快的找到病因进行治疗。

主权项

一种研究人体无精症和严重少精症快速测试的方法，其步骤包括：a)样品收集：提取相同等份严重少精症/无精症患者和正常男性的血液、精浆、尿液样本，及提取所述相同等份严重少精症/无精症患者和正常男性睾丸中的睾丸组织和液氮，进行保存；b)样品处理，包括：精浆处理、尿液处理、睾丸组织处理；所述精浆处理是指首先将精液进行离心处理、收集上清，提取精浆中总蛋白，再用蛋白组学方法获取不同类型群体精浆的差异蛋白，最后用western blotting方法对差异蛋白进行验证；所述尿液处理是指首先将收集到的尿液进行离心处理，去除杂质，再用代谢组学方法检测不同类型群体尿液代谢产物差异；所述睾丸组织处理是指采集的睾丸组织从RNA保护液中取出，再用提取RNAs，然后利用miRCURY LNA expression array方法进行差异microRNA的鉴定，最后用real‑time PCR方法进一步验证差异microRNA的表达。c)根据差异基因的表达，利用real‑timePCR平台诊断及利用所述精浆中差异蛋白或所述尿液中的差异代谢产物的结果进行ELISA检测。